桂花萜烯合酶TPS的生物信息学与原核表达分析-广西植物.pdf

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-   Guihaia - http:/ / www.guihaia journal.com   May 2019ꎬ39(5):624 632 DOI:10.11931/ guihaia.gxzw201811016 - 引文格式:曾祥玲ꎬ邹晶晶ꎬ王彩云. 桂花萜烯合酶(TPS)的生物信息学与原核表达分析 [J]. 广西植物ꎬ2019ꎬ39(5):624 632. ZENGXLꎬZOUJJꎬWANG CY. Bioinformatic and prokaryotic expression analysisof terpene synthase (TPS)from Osmanthusfragrans [J]. - Guihaiaꎬ2019ꎬ39(5):624 632. 桂花萜烯合酶(TPS)的生物信息学与原核表达分析 1ꎬ2 1ꎬ2 2∗ 曾祥玲 ꎬ邹晶晶 ꎬ王彩云 ( 1.湖北科技学院核技术与化学生物学院ꎬ湖北咸宁437100ꎻ2.华中农业大学 园艺植物生物学教育部重点实验室ꎬ武汉430070 ) 摘  要:挥发性萜烯类化合物是植物花和果实中重要的香气活性物质ꎬ萜烯合酶(TPS)的种类和功能决定物 种中萜烯类物质的多样性ꎮ 桂花作为重要的香花植物ꎬ萜烯类物质是其花香的重要成分ꎬ但有关桂花萜烯合 酶的研究却并不多ꎮ 为揭示桂花萜烯类物质的生物合成机理ꎬ该研究利用生物信息学分析了4个TPS蛋白的 理化性质、亚细胞定位及其结构ꎬ在原核表达系统中进行4个TPS蛋白的体外表达ꎬ并对可溶性的TPS4重组 蛋白进行了体外酶反应功能分析ꎮ 结果表明:(1)4个TPS蛋白的理化性质差异较小ꎬ但仅有TPS4蛋白定位 于其他靶向ꎬ不含信号肽ꎬ延伸链的比例较低ꎬ在靠近氨基端的区域内不含延伸链ꎮ (2)4个TPS蛋白在原核 系统中均可成功表达ꎬ但仅有TPS4获得了可溶性重组蛋白ꎮ (3)将纯化的TPS4重组蛋白分别与GPP、NDP 和FPP进行反应ꎬ均只检测到一种产物ꎬ分别为反式 ̄β ̄罗勒烯、β ̄水芹烯和α ̄法呢烯ꎮ 这为揭示植物萜烯类 物质生物合成的分子机理提供了参考ꎬ对从蛋白水平研究桂花花香基因功能奠定了基础ꎮ 关键词:桂花ꎬ萜烯合酶ꎬ原核表达ꎬ花香 中图分类号:Q943    文献标识码:A    文章编号:1000 ̄3142(2019)05 ̄0624 ̄09 Bioinformatic and prokaryotic expression analysis of terpene synthase (TPS)from Osmanthusfragrans 1ꎬ2 1ꎬ2 2∗ ZENGXiangling ꎬZOUJingjing ꎬWANG Caiyun ( 1.School of Nuclear Technology and Chemistry &BiologyꎬHubei University of Science and TechnologyꎬXianning437100ꎬHubeiꎬChinaꎻ 2.Key Laboratoryfor Biology of Horticultural PlantsꎬMinistry of EducationꎬHuazhongAgricultural UniversityꎬWuhan430070ꎬChina ) Abstract:Vo

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