硫磺熏制白芍的安全性评价初步研究Primarysafety-药学学报.pdf

486 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2012, 47 (4) : 4 86 49 1 硫磺熏制白芍的安全性评价初步研究 1 1* 1 2, 3 2 2, 3* 黄山君 , 王 瑞 , 石燕红 , 杨 莉 , 王再勇 , 王峥涛 ( 1. 上海中医药大学中药学院, 上海 201203; 2. 上海中药标准化研究中心, 上海 201203; 3. 上海中医药大学中药研究所, 中药标准化教育部重点实验室, 上海 201203) 摘要: 建立硫磺熏制白芍中芍药苷及其衍生物芍药苷亚硫酸酯、芍药内酯苷的高效液相色谱含量测定方法, 并通过对芍药苷亚硫酸酯的细胞毒性以及白芍药材的小鼠急性毒性评价, 对硫磺熏制前后的白芍进行安全性评 价研究。含量测定采用Shiseido Capcell PAK C 18 (250 mm ×4.6 mm ID, 5 μm) 色谱柱, 流动相乙腈 0.02%磷酸水 溶液 ( 15 ∶85), 检测波长230 nm, 流速1.0 mL·min 1, 柱温30 ℃; 采用MTT 法考察芍药苷亚硫酸酯对小鼠原代 肝细胞和人原代肝细胞的毒性; 采用小鼠灌胃最大给药量法考察芍药苷亚硫酸酯和白芍的急性毒性。芍药苷亚硫酸 酯、芍药苷和芍药内酯苷分别在0.041 8～1.045 0 mg·mL 1、0.023 5～0.587 5 mg·mL 1 和0.039 8～0.995 0 mg·mL 1 内呈良好线性, r 0.999 8, 平均回收率99.11%～101.71%, RSD 2%; 芍药苷亚硫酸酯的浓度≤300 μmol·L 1, 各 检测浓度均无明显细胞毒性; 芍药苷亚硫酸酯水溶液和白芍水提物分别进行小鼠灌胃给药, 最大耐受量分别为 5 g·kg 1 和80 g·kg 1 。建立的白芍中3 个成分含量测定方法简单快速、准确可靠、重复性好; 硫磺熏制后白芍中 芍药苷的含量显著降低, 且芍药苷亚硫酸酯的含量与芍药苷的含量呈负相关; 体外肝细胞和体内小鼠急性毒性 实验未发现芍药苷亚硫酸酯的毒性, 硫磺熏制白芍及白芍水提物比较无显著的毒性。 关键词: 白芍; 硫磺熏制; 芍药苷亚硫酸酯; 细胞毒性; 急性毒性 中图分类号: R994 文献标识码:A 文章编号: 05 13-4870 (2012) 04-0486-06 Primary safety evaluation of sulfated Paeoniae Radix Alba 1 1* 1 2, 3 2 2, 3* HUANG Shan-jun , WANG Rui , SHI Yan-hong , YANG Li , WANG Zai-yong , WANG Zheng-tao (1. School of Pharmacy, Shanghai University of Traditional Chinese M edicine, Shanghai 201203, China; 2. Shanghai R D C