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专题14
生物技术实践
;答案速填:①酚红指示剂 ②尿素 ③刚果红染色法 ④稀释涂布平板法 ⑤显微镜直接计数法 ⑥计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 ⑦碳源、氮源、水、无机盐 ⑧琼脂 ⑨煮沸消毒法、巴氏消毒法等 ⑩灭菌 ?灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 ?平板划线法 ?萃取 ;【知识·方法】
一、微生物的分离和培养
1.微生物培养的2种基本技术:
(1)培养基的制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
(2)无菌技术:主要包括消毒和灭菌。;2.微生物分离的2种方法:
(1)平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面的连续划线将聚集的菌种分散开。
(2)稀释涂布平板法:通过系列梯度稀释,将聚集的菌种分散开。;3.2种微生物的筛选与鉴定:
(1)筛选微生物的2种选择培养基。
①以尿素为唯一氮源的培养基:选择培养尿素分解菌。
②富含纤维素的培养基:选择培养纤维素分解菌。;(2)鉴别微生物的2种鉴别培养基。
①添加酚红指示剂的培养基:尿素分解菌可使该培养基变红。
②添加刚果红的培养基:纤维素分解菌的菌落周围产生透明圈。 ;4.微生物计数的2种方法:
(1)直接计数法:用血细胞计数板借助显微镜观察计数,实验结果偏大。
(2)间接计数法:稀释涂布平板法,实验结果偏小。;二、传统发酵技术
1.4种传统发酵食品的制作:;2.控制杂菌的“4大”措施:
(1)通过发酵条件控制杂菌。
①无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。
②乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。;(2)利用盐控制杂菌:如腐乳的制作。
(3)利用酒精控制杂菌:如果酒、腐乳的制作。
(4)利用香辛料控制杂菌:如腐乳、泡菜的制作。 ;3.影响酒精发酵的“2大”因素:
(1)发酵前期供氧不足。
①结果:酵母菌数量少,产生的酒精少。
②原因:发酵前期,酵母菌需要通过有氧呼吸大量增殖,所以需要通入空气或在发酵瓶中留有一定的空间。;(2)发酵后期密封不严。
①结果:酵母菌数量充足,但是产生的酒精较少或不能产生酒精。
②原因:发酵后期要通过密封严格控制无氧环境,以利于酵母菌通过无氧呼吸产生酒精。 ;三、植物有效成分的提取
1.植物有效成分的3???提取方法:
(1)蒸馏法:适合提取化学性质稳定、易挥发且不与水混溶的物质。
(2)压榨法:适合提取高温易分解或原料易焦糊且含量较高的物质。
(3)萃取法:适合提取易溶于有机溶剂的物质。;2.物质分离的5种方法:
(1)分液法:分离油水混合物。
(2)过滤法:除去固体物和残渣。
(3)离心法:除去液体中质量较小的固体残留物。
(4)加入无水硫酸钠后过滤的方法:除去芳香油中的残留水分。
(5)蒸馏法:除去萃取液中的有机溶剂。;3.冷凝管的2种用法:
(1)冷凝收集油水混合物:如玫瑰精油的提取。
(2)冷凝回流:如胡萝卜素的提取。;【易错·易混】
1.自养生物与异养生物所需的碳源不同:
(1)自养生物:需要利用CO2作为碳源。
(2)异养生物:需要利用含碳有机物作为碳源。;2.好氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌生活环境不同:
(1)好氧菌:生活在氧气充足的环境中,会集中分布在培养液上层。
(2)厌氧菌:生活在无氧环境中,会集中分布在培养液的底层。
(3)兼性厌氧菌:有氧无氧环境均可,会随机分布在培养液中。;3.选择培养基上长出的菌落不一定就是目的微生物:
(1)原因:会出现假阳性反应。
(2)实例:在以尿素为唯一氮源的培养基上可能会长出固氮菌的菌落。;4.酒精发酵的条件不适合醋酸发酵:
(1)发酵温度不同:酒精发酵18~25℃,醋酸发酵30~35℃。
(2)氧气条件不同:酒精发酵需要无氧环境,醋酸发酵需要有氧环境。;5.并非易挥发的物质都可以采用蒸馏法提取:
(1)不耐热的物质不能用蒸馏法提取。
(2)原料易焦糊的物质不能用蒸馏法提取。;题型一 微生物的培养与应用
【典例1】(2017·全国卷Ⅰ·T37)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:
世纪金榜导学 (1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生___________________________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是__________________________________________,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_______________________________________(答出两点即可)。;(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择_____________________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是____________________
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