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- 2019-08-03 发布于天津
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(1)限制性内切酶能够识别和切割单链DNA,例如有些酶能够识别和切割非回文序列,但这种酶在基因工程应用不够广泛 DNA分子的两条脱氧核苷酸长链是反向平行的,一条链是5’→3’方向,另一条是3’→5’方向。在一般表示DNA分子碱基序列的图中,上边一条链是5’→3’方向,下边一条是3’→5’方向。限制性内切酶的识别序列也是有方向性的,通常写出的限制酶的识别序列是专指5’→3’那条链上的碱基序列。在上面的例题中,限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点就是5’—G↓GATCC—3’,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是5’—↓GATC—3’。所以上图画的序列中,目的基因所在的DNA序列,只有左边具有一个限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点,右边的那个序列是5’—CTAG—3’,不能被限制性内切酶Ⅱ识别和切割,因此上述设想的那种情况不会出现。 下图表示限制酶切割某DNA的过程,从图中可知,该限制酶能识别的碱基序列及切点是 A.CTTAAG,切点在C和T之间 B.CTTAAG,切点在G和A之间C.GAATTC,切点在G和A之间 D.CTTAAC,切点在C和T之间 CaCl2法制备感受态细胞及转化过程:细菌处于0℃,CaCl2的低渗溶液中,菌细胞膨胀成球形 ,制成感受态,经42℃短时间热冲击处理能提高转化的效率。 低温的CaCl2溶液中 ,(1)Ca2+会使细胞膜磷脂双分子层形成液晶结构 ,
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