核酸的结构与功能-2.pptVIP

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一、核酸的发现和研究工作进展 1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 DNA中含有的碱基是:A T C G RNA中含有的碱基是:A U C G 紫外吸收的特性(共轭双键) 吸收波长:260nm 用于定量测定 核苷:戊糖与含氮碱基脱水缩合而生成 糖苷键 假尿嘧啶(Ψ)核苷 的糖苷键不是C-N键,而是C-C键 核苷酸的结构与命名 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质: NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 二、核酸的一级结构 定义: 核酸中核苷酸的排列顺序。 由于核苷酸间的差异主要是碱基不同,所以也称为碱基序列。 三、DNA的功能 RNA通常以单链形式存在,但也可形成局部的双螺旋结构。 RNA分子的种类较多,分子大小变化较大,功能多样化。 * tRNA的一级结构特点 tRNA是分子最小(70~90个核苷酸) 含 10-20% 稀有碱基,如 DHU、?等 3′末端为 — CCA-OH(氨基酸臂) 5′末端大多数为G 具有 T?C tRNATyr: 可以和Tyr结合的tRNA Tyr-tRNATyr : 结合了Tyr的tRNA 一、核酸的一般理化性质 核酸具有酸性; DNA分子粘度大;RNA 分子粘度小 能吸收紫外光,最大吸收峰为260nm。可用于核酸的定性和定量测定。 热变性 解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。 探针技术 利用核酸的分子杂交,可以确定或寻找不同物种中具有同源顺序的DNA或RNA片段。 在核酸杂交分析过程中,常将已知顺序的核酸片段用放射性同位素或生物素进行标记。这种带有一定标记的已知顺序的核酸片段称为探针。 第五节 核 酸 酶 Nuclease ncRNA 功能 参与转录调控、RNA的剪切和修饰、mRNA的稳定和翻译调控、蛋白质的稳定和转运、染色体的形成和结构稳定等细胞重要功能 lncRNA 功能 lncRNA在结构上类似于mRNA,但序列中不存在开放读框。许多已知的lncRNAs由RNA聚合酶Ⅱ转录并经可变剪切形成,通常被多聚腺苷酸化。lncRNA具有复杂的生物学功能,并与一些疾病的发病机制密切相关。有的lncRNA能使基因沉默,有的则激活基因的表达。 核内小RNA 核仁小RNA 胞质小RNA 催化性小RNA 小干涉 RNA 微 RNA 短链非编码RNA亦称为非编码小RNA(small non-messenger RNA) 核内小RNA(small nuclear RNA, snRNA)位于细胞核内。snRNA有5种,分别称为U1、U2、U4、U5、U6,它们与多种蛋白形成复合体,参与真核细胞hnRNA的内含子加工剪接(第十六章)。 核仁小RNA(small nucleolar RNA, snoRNA):定位于核仁,主要参与rRNA的加工和修饰,如rRNA中核糖C-2?的甲基化修饰。 胞质小RNA(small cytoplasmic RNA, scRNA):存在于细胞质中,参与形成信号识别颗粒,引导含有信号肽的蛋白质进入内质网定位合成(第十七章)。 催化性小RNA亦被称为核酶(ribozyme)。是细胞内具有催化功能的一类小分子RNA,具有催化特定RNA降解的活性,在RNA的剪接修饰中具有重要作用。 小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)是生物宿主对于外源侵入基因表达的双链RNA进行切割所产生的具有特定长度(21~23 bp)和特定序列的小片段RNA。这些siRNA可以单链形式与外源基因表达的mRNA相结合,并诱导相应mRNA降解。 微RNA(microRNAs, miRNAs ) 是一类长度为22nt左右的内源性sncRNA。miRNAs主要是通过结合mRNA而选择性调控基因的表达。 核 酸 的 理 化 性 质 The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid 第 四 节 1. DN

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