季花药培养-公开课.pptVIP

生长素细胞分裂素： 生长素=细胞分裂素： 生长素细胞分裂素： 阅读：P37-38被子植物的花 粉发育 重点掌握：被子植物花粉的发育过程 阅读：P38 产生花粉植株的两种途径 重点掌握：花药培养产生花粉植株的两种途径 1、材料的选择 不同植物的诱导成功率不同. 同一植物的不同生理状况也对诱导成功率有直接的影响. （二）材料的消毒 5、无菌水冲洗3～5次 花药的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态 （三）接种和培养 1、灭菌后花蕾，要在 下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。 * * * * * 离体的植物器官、组织或细胞（外植体） 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 植物激素： 细胞分裂素、生长素 再分化 遮光 光照 植物组织培养的过程 1、细胞分裂素和生长素使用顺序不同，结果不同: 同时使用 先使用细胞分裂素，后使用生长素 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 有利于细胞分裂，但细胞不分化 细胞既分裂也分化 分化频率加快 2、细胞分裂素和生长素使用比例不同，发育方向不同 利于根的分化和抑制芽的形成 促进愈伤组织的生长 有利于芽的分化、抑制根的形成 大自然为我们创造了千姿百态的植物，许多植物都会开出鲜艳、芳香的花朵。 月季 牡丹 导入新课 百合 你知道这些绚丽、芬芳的鲜花用人工方法是怎样产生的吗？ 花药 花药是花丝顶端膨大呈囊状的部分，是雄蕊产生花粉的主要部分。 花药培养 采用植物组织培养技术，把发育到一定阶段的花药，通过无菌操作技术，接种在人工培养基上，以改变花药内花粉粒的发育程序，诱导其分化，形成细胞团，进而形成愈伤组织，随后使愈伤组织分化成完整的植株的技术。 什么是花药培养呢？ 课题2 月季的花药培养 花的结构 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 2、由花粉母细胞（即小孢子母细胞） 花粉， 即：单倍体的生殖细胞。 （一）被子植物的花粉发育 1、雄蕊 一、基础知识 减数分裂 3、阶段： 四分体时期、单核期、双核期 4、过程： 减数分裂 有丝分裂 花粉：是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 1花粉母细胞 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 注意：精子和营养核的基因型相同。 （二）产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，它的发育过程也与合子胚类似，胚芽、胚根、胚轴等结构完整，就像一颗种子。 这两种途径之间没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及浓度配比。 (三)、影响花药培养的主要因素 ——材料的选择与培养基的组成 从花药看： 从花粉看： 从花蕾看： 此外，植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等对诱导成功率有一定影响。 月季的初花期（五月初到五月中旬） 单核期（一般来说，细胞核从中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最高） 完全未开放的 选择哪个做材料？ 答：花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 思考 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 二、 实验操作 （一）材料的选取 （二）材料的消毒 （三）接种和培养 阅读教材 P39-40 回答以下问题： 1.如何确定花粉是否处于适宜的发育期。 2.确定花粉发育时期的最常用方法是？如果某些花粉细胞核不易着色，需要采用什么方法？能将花粉细胞核染成什么颜色？ 3.为什么要彻底除去花丝？ 4.是否一直需要光照？ 5.什么时候把植株移栽到新的培养基上？ 6.为什么还要进一步的鉴定和筛选？ （一） 材料的选取 1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2. 最常用的方法：醋酸洋红法（将染色体染成红色） 焙花青—铬矾法。 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 1、花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30秒 2、无菌水清洗 3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4分钟 （质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 3、通常每瓶接种花药 ，温度控制在 左右， 。幼小植株形成后