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- 2020-02-10 发布于江西
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凝胶电泳常见问题分析
2008-09-15 21:43
要跑琼脂糖凝胶电泳, 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗?能够照相的清楚的条带,至少需要多少量呢?参考见解:5ng 已经可以了,但是或许20ng50ng-200ng效果好,在此范围内呈线性。把210bp的pcr产物进行酶切,得到190+20bp的两个片段,请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大浓度的胶和多大的电压呢?参考见解:可以用琼脂糖凝胶电泳分开,电压不变,可用1.5%到2%的胶,20bp得片断不一定能看得到,所以应用未酶切的PCR片断作对照.
琼脂糖浓度(W/V)
大小范围(bp)
0.6%
1000-23000
0.8%
800-10000
1.0%
400-8000
1.2%
300-7000
1.5%
200-4000
2%
100-3000
丙烯酰胺凝胶电泳更适合于分离纯化小分子量核酸(5-500bp)并且分辨率高,可以达到1个bp。所以建议进行丙烯酰胺凝胶电泳试试。Marker做琼脂糖凝胶电泳,发现Marker在加样孔有一个明显的亮带,什么原因?参考见解:marker有时会出现这样的问题,应该是时间久了。新买时跑胶在点样孔没有,过一段时间就会在点样孔出现亮点。也可能是蛋白,有时DNA提的不纯含有蛋白时就会出现上样孔有条带的现象。琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,跑出的带后面出现拖尾现象,什么
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