第34章 DNA的复制和修复课件.ppt

？ （一）DNA是生物遗传的物质基础——遗传信息的载体 遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上，表现为特定的核苷酸排列顺序——三联体密码。 DNA RNA protein replication transcription reverse transcription translation replication （二）中心法则 Chapter31 DNA的复制和修复 一、基因信息的传递 Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （一）DNA的存在形式 染色体与质粒 严紧控制质粒 又叫单拷贝质粒：每个细胞内只有一个或少数几个拷贝 松弛控制质粒 又叫多拷贝质粒：每个细胞内含有许多拷贝（20以上） DNA复制 是指DNA的自我复制，也就是以亲代DNA为模板产生子代DNA的过程，最初称DNA的半保留复制（semiconservation replication），进一步的研究发现半保留复制为半不连续复制（semidiscontinuous replication）。 Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （二）DNA的半保留复制 DNA进行复制时，双螺旋结构解开而成为单链，用于合成新的互补链。子代细胞出现新的DNA双链，其中一股单链是从亲代完整地接受过来的。另一股单链完全重新合成，且按碱基配对原则互补。 1、DNA半保留复制的概念 2、DNA半保留复制的证据 氮同位素示踪试验和放射自显影法 意义：保持DNA在代谢上的稳定性。 DNA半保留复制的证据 Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （三）DNA复制的起点(origin)和方式 复制子(replicon)：基因组能独立进行复制的单位叫复制子，每个复制子都含有控制复制起始的origin和终止复制的terminus。 双向复制(bi-directional)、单向复制(unidirectional)； 复制叉(replication fork)或生长点(growing point) 多复制子(multi-replication) Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （四）DNA聚合反应和有关的酶 这种能催化DNA合成的酶称DNA聚合酶（DNA polymerase） 1.底物 dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP) 2.聚合酶 DNA聚合酶（DNA依赖的DNA 聚合酶) DNA--pol 3.模板　单链的DNA母链 4.引物　寡核苷酸引物（RNA) 5.其他酶和蛋白质因子 解链酶，解旋酶，单链结合蛋白，连接酶　　 聚合机制 DNA聚合酶具有 5′至3′的聚合活性（ 5′→ 3′ ） 需要引物链的存在 其次 ，DNA聚合酶具有核酸外切酶活性 ① 3′→5′外切酶活性 ② 5′→3′外切酶活性 DAN聚合酶（DNA polymerase）分类 大肠杆菌DNA聚合酶 大肠杆菌有三种不同的DNA聚合酶，即DNA聚合酶I、II 和III。 DNA聚合酶I是一种多功能酶：（1）沿5’→3’方向延长DNA链（DNA聚合酶活力）；（2）由3’端水解DNA链（ 3’ → 5’核酸外切酶活力）； （3）由5’端水解DNA链（ 5’ → 3’核酸外切酶活力）等功能。 ——常用的工具酶 复制准确性的保证： DNA复制过程中碱基的配对受到双重核对，即DNA聚合酶的选择作用和3’ → 5’ 外切酶的校正作用。 DNA聚合酶II： 只具有3’ → 5’核酸外切酶活力 DNA聚合酶III：真正起复制作用的酶，对温度敏感（看414页） Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （五） 复制中的解链和DNA分子的拓扑学变化 1、解螺旋酶 领头链 rep蛋白 Dna B 随从链 解链酶Ⅱ Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （五） 复制中的解链和DNA分子的拓扑学变化 2、DNA拓扑异构酶(解旋酶） 3、引物酶和引发体 引物酶 RNA聚合酶 Dna G（RNA聚合酶） 引发体 Dna A辨认复制启始点，再结合Dna B, Dna C及其他复制因子形成复合体 Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （五） DNA连接酶（ligase）催化两段DNA之间的连接 Chapter31 DNA的复制和修复 二、DNA的复制 （六） DNA 的半不连续复制 日本学者冈崎等提出了DNA的不连续复制模型（1968）。 1、D