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1 原核生物启动子(Promoter)的碱基组成 (1)TATA box(Goldberg-Hogness box) (2) 上游元件(UPE) (3)远端控制区 转录过程的电镜照片 依赖Rho (ρ)因子的转录终止(弱终子) 非依赖Rho因子的转录终止(强终子) ① ?因子直接识别序列: (3)终止方式 ? RNA编辑作用说明,基因的编码序列经过转录后加工,是可有多用途分化的,因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 核酶的发现,对中心法则作了重要补充; 核酶的发现是对传统酶学的挑战; 利用核酶的结构设计合成人工核酶 。 1.何谓转录(transcription),何为转录单元(transcription Unit). 2.转录与复制的异同点. 3.原核生物及真核生物启动子的特点. 4.不依ρ因子的终止子(ρ-dependent terinator)的结构特点. 5.何谓顺式作用元件(cis-acting elements),何为反式作用因子(trans-acting factor),并分别举例说明. 6.真核生物转录后修饰有几种方式? 7.什么是基因,什么是断裂基因(splitting gene)?断裂基因是真核生物的真质标记(hall marker)吗? 8.何为核酶(ribozyme)? 9. 何为cDNA?它在体内是如何产生的? 2. mRNA的剪接 1. hnRNA 和 snRNA 核内的初级mRNA称为杂化核RNA (hetero-nuclear RNA, hnRNA) snRNA (small nuclear RNA) 核内的蛋白质 小分子核糖核酸蛋白体 (并接体, splicesome) snRNA 剪切的目的: 去内元(intron) 真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因。 断裂基因(splite gene) C A B D 编码区 A、B、C、D 非编码区 外显子(exon)和内含子(intron) 外显子 在断裂基因及其初级转录产物上出现,并表达为成熟RNA的核酸序列。 内含子 隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序列。 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 目 录 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 目 录 外显子真的都显吗? 否。 1. tRNA、rRNA基因理所当然不显; 2. 一般基因前后两个外元不编码或部分编码氨基酸;锥虫反式拼接上去的外元就不编码任何氨基酸; 3. 人干扰素基因没有内元; 内元是真核生物的真质标记(Hall Marker)吗? 否。 原核生物T4噬菌体的1018个碱基就有内元。 内含子真的含而不露?否。酵母细胞色素氧化酶基因反式拼接的反式作用因子就是其内元的产物 内含子的分类 根据基因的类型和剪接的方式,通常把内含子分为4类。 I:主要存在于线粒体、叶绿体及某些低等真核生物的 rRNA基因; II:也发现于线粒体、叶绿体,转录产物是mRNA; III:是常见的形成套索(lasso)结构后剪接,大多数mRNA基因有此类内含子; IV:是tRNA基因及其初级转录产物中的内含子,剪接过程需酶及ATP。 mRNA的剪接 —— 除去hnRNA中的内含子,将外显子连接。 snRNP与hnRNA结合成为并接体 ① 目 录 ② ③ UACUACA - AG UG U4 U5 U6 E1 E2 U1 U2 UACUACA - AG UG U6 E1 E2 U1、U4、U5 pG-OH (ppG-OH, pppG-OH) U-OH GpU pGpA 第一次转酯反应 第二次转酯反应 UpA GpU 外显子1 内含子 外显子2 G-OH UpU pGpA 剪接过程的二次转酯反应 (twice transesterification) mRNA的编辑(mRNA editing) 人类apo B基因 mRNA(14500个核苷酸) 肝脏 apo B100 (分子量为500 000) 肠道细胞 apo B48 (分子量为240 000) mRNA编辑 3、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA 目 录 RNAaseP、内切酶 目 录 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 目 录 碱基修饰 (2)还原反应 如:U ? DHU (3)核苷内的转位反应 如:U ? ψ (4)脱氨反应 如:A ?
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