实验二福医大红细胞计数.pptVIP

实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数;（一）改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 临指导P7;;;2. 改良牛鲍氏计数板的使用方法 1)准备计数板：用绸布擦拭，“推压”法加盖玻片 2)稀释的血液：准确吸取稀释液和血液，立即混匀。 3)充池：充池前充分混匀稀释液，充池要一次性完成，充液不能过多、过少、有气泡、断续充液、充池后移动盖玻片。 4)静置2-3min，待细胞下沉。 ;5)显微镜计数：小心移动；手和显微镜镜头不能 碰到盖玻片。 6)计数原则：逐格计数； 按一定方向进行计数； 对压线细胞遵循“数上不数下，数 左不数右”的原则。;;1.保证所用器材清洁，勿用手触膜。 2. )充池：充池前充分混匀稀释液，一次性完成，充液不能过多、过少、有气泡、断续充液。 3.充池后移动盖玻片。 4.计数池使用后用蒸馏水冲，纱布轻试，切不可用粗糙织物擦试，以免磨损刻度。 ; （二） 红细胞计数P14;2.红细胞稀释液 （1）Hayem（赫姆氏液）即传统的红细胞稀释液 ▲成分及作用： 氯化钠：调节渗透压至等渗 硫酸钠：提高比密，防止细胞粘连 氯化高汞：防腐剂 ▲缺点：遇高球蛋白血症患者，球蛋白沉淀使红细胞 容易凝结。;（二）红细胞计数--2.红细胞稀释液; (3)不含甲醛的枸橼酸盐： ▲成分及作用：31.3g/L的枸橼酸钠。 ▲优点：遇自身凝集素增高者，可使凝集的红细胞分散并照常计数。 （4）急诊时可用生理盐水或含1%甲醛的生理盐水作为红细胞稀释液。 ;3.操作步骤 （1）准备稀释液：加红细胞稀释液(赫姆氏液)2.0ml于试管中。 （2）采血：10 μl至稀释液中，立即混匀。 （3）准备计数板、混匀稀释液、充池、静置2-3min。 （4）显微镜计数：高倍镜下计数中间大方格内四角及中央的5个中方格内的红细胞总数。 ;4．计算 红细胞数/L =N×25/5×10×106×200=N×1010=N/100×1012 参考值： 成年男性：4.0—5.5 * 1012/L； 成年女性：3.5—5.0 * 1012/L； 初生儿: 6.0—7.0* 1012/L ; 5．注意事项： （1）同白细胞计数 （2）红细胞在计??池中若分布不均，每个中方 格之间相差超过20个以上时要重新充池计数。正 常数值范围内，2次红细胞计数相差不得超过5%。