生物转换之新机能微生物的育种.docVIP

生物轉換之新機能微生物的育種 Breeding of new functional bioconversion microbes 研究生： 陳錦惠 Chin-Hui Chen 指導教授： 鄧德豐 【摘要】 本實驗利用細胞融合技術，以Schizosaccharomyces pombe 的原生質體為主體，分別與植物葉綠體或Monascus anka、Saccharomyces diastaticus、Zymomonas mobilis、Lentinus edodes等之原生質體間進行融合，或將所獲得的酵母融合株再次進行融合，以期能獲得新機能之酵母菌株。由實驗結果所示，以含水量80%之麩皮與木屑比例為1:1.5的培養基，添加0.2~0.3%幾丁質粉末，培養Trichoderma viride 4天後，以90mL含0.6M KCl的50mM磷酸緩衝溶液(pH5.5)來萃取出細胞壁分解酵素，在45?C、50rpm振盪反應，可獲得M. anka、S. diastaticus、L. edodes之原生質體。但若要獲得Z. mobilis的原生質體則是添加300 μg/mL Lysozyme於含有0.8M sucrose為滲透壓穩定劑的細胞壁分解溶液中，在pH7.5、30?C下靜置反應則可獲得。在融合體形成最適條件方面：Schi. pombe原生質體與香菜葉綠體濃度皆