生物-三年模拟精选 专题二十二.doc

A组　基础巩固 1.(2015·四川遂宁零诊考试)下表是某同学列出的分离土壤中微生物培养基的配方，据此回答下列问题： 培养基配方 KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定溶到1 000 mL (1)从作用上看，该培养基属于________培养基，提供氮源的物质是________，细菌能利用该氮源是由于体内能合成________酶。 (2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入________指示剂，若指示剂变________，说明有目的菌株存在。 (3)为了测定微生物的数量，接种时应采用________法，某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为180、155、176、129个，则每毫升原土壤样液中上述微生物的数量为________，测定的活菌数比实际活菌数________(填“低”“高”“基本一致”)。 解析　(1)题干指出下表是分离土壤中微生物的培养基的配方，其中尿素是作为唯一氮源，能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源，所以该培养基从用途上属于选择培养基。细菌能利用该氮源是由于体内能合成脲酶。 (2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时，还需在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，说明有目的菌株存在。 (3)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法，其中稀释涂布法能用于微生物的计数。1毫升原土壤样液中上述微生物数量＝(180＋155＋176＋129)÷4×106×10＝1.6×109个；用稀释涂布平板法进行微生物的计数，但统计的数量比实际数量会偏少，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 答案　(1)选择　尿素　脲(催化尿素分解的)　(2)酚红　红　(3)稀释涂布平板　1.6×109　低 2.(2015·北京海淀模拟)为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作。 (1)为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是______________________________________________________。 制备的培养基常用________法进行灭菌。 (2)科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液。为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行________，用________法接种于固体培养基上。接种后的培养基________状态放入培养箱。 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂 0.1 g 0.5 g 3 g 0.01 g 2 g 15 g 加至1 L (3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和________直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。 (4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的________(填“上清液”或“沉淀物”)获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将________与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。 解析　(1)由于实验目的是分离果胶酶产生菌，所以培养基中需要加入果胶，在配制过程中，需要用蒸馏水先配制成液体培养基，再凝固成固体培养基。制备的培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 (2)为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行梯度稀释，并用稀释涂布法接种于固体培养基上。接种后的培养基倒置状态放入培养箱，防止培养皿盖上凝结的水珠落入培养基造成污染。 (3)选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液(果胶与刚果红结合后显红色)，一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和水解直径的比值，筛选果胶酶高产菌株。 (4)将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的上清液获得粗提的果胶酶。将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性。进行吸光值测定时，需将等量失活的粗提果胶酶与等量果胶溶液混合，作为实验的对照。 答案　(1)果胶和蒸馏水　高压蒸汽灭菌 (2)梯度稀释　(稀释)涂布　倒置 (3)水解(或“透明”) (4)上清液　等量失活的粗提果胶酶 3.(2014·荆门调研)从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。 (1)接种前要对培养基进行__________处理。在整个微生物的分离和培养过程中，一定要注意在__________条件下进