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答案 (1)逆转录酶 可以 (2)根据这一序列合成引物 目的基因受热变性解旋为单链 (3)Ti质粒的T-DNA 染色体的DNA MPT64蛋白 (4)MPT64基因 解析 (1)获取目的基因的方法有反转录法,即可从结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段。获得的cDNA片段只包含基因的编码区,没有非编码区,该cDNA片段可以实现物种间的基因交流。(2)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,前提是要有一段已知MPT64基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物,在操作步骤中需要加热至90~95 ℃的目的是目的基因受热变性解旋为单链。(3)根据农杆菌的特点,如果将MPT64基因插入到Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入胡萝卜细胞,并将其插入到植物细胞中的染色体的DNA上。要确认MPT64基因是否在胡萝卜植株中表达,应检测胡萝卜植株中是否含有MPT64蛋白。(4)科学家探知,如果将MPT64蛋白第20位和第24位的氨基酸都改变为半胱氨酸,以更好地保证所生产的肺结核疫苗分子的稳定性,根据蛋白质工程的原理,可对MPT64基因进行修饰或改造,以达到生产目的。 知识拓展 获得目的基因的方法:①从基因文库中获取;②利用PCR技术扩增;③人工合成(利用mRNA反转录合成或通过DNA合成仪用化学方法人工合成)。 3.(2017广西桂林、百色、崇左一模,38)将外源基因整合到叶绿体基因组中并成功表达,这就是叶绿体转基因技术,该技术能有效改良植物的品质。请回答下列问题: (1)若要在短时间内大量扩增外源基因,可采用PCR技术,该技术利用了 ????的原理。 (2)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,因其不会随???? ????(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而保持了 ????(填“父本”或“母本”)的遗传特性。 (3)利用 ????处理植物体细胞可得到原生质体,再通过 ????法将目的基因导入原生质体,当原生质体再长出 ????时,便可通过植物组织培养技术培养出相应的转基因幼苗。 (4)一个完整的基因表达载体应该包括启动子、 ????等,启动子位于基因的首端,它是 ????,有它才能启动基因转录。 答案 (1)DNA双链复制 (2)花粉 母本 (3)纤维素酶和果胶酶 农杆菌转化(或基因枪) 细胞壁 (4)目的基因、标记基因、终止子 RNA聚合酶结合和识别的部位 解析 (1)PCR技术依据的原理是DNA双链复制。(2)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,叶绿体转基因属于细胞质遗传,具有母系遗传特点,而花粉中细胞质较少,受精卵中细胞质几乎全部来自卵细胞,因此叶绿体转基因不会随着花粉遗传给后代。(3)植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶,根据酶的专一性,可以利用纤维素酶和果胶酶处理植物体细胞得到原生质体,再通过农杆菌转化(或基因枪)法将目的基因导入原生质体,当原生质体再生出细胞壁时,便可通过植物组织培养技术培养出相应的转基因幼苗。(4)一个完整的基因表达载体应该包括启动子、目的基因、标记基因、终止子等,启动子位于基因的首端,它是RNA聚合酶结合和识别的部位,有它才能启动基因转录。 知识归纳 基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 非选择题(共60分) B组 2016—2018年高考模拟·综合题组 (时间:30分钟 分值:60分) 1.(2018四川宜宾第二次诊断性检测,12)(15分)请结合所学知识,回答下列有关问题: (1)基因工程中将目的基因导入植物细胞时多采用 ????法。这种方法一般不适用于 ????(单子叶/双子叶)植物。将目的基因导入受体细胞时,主要是利用T-DNA可转移到受体细胞并 ????的特点。要想检测导入抗虫棉的Bt毒蛋白基因是否表达,在分子水平上可用 ????法进行检测。 (2)在单克隆抗体制备过程中,将杂交瘤细胞进行扩大培养之前至少需要经过两次筛选,方法分别是 ????和 ????。单克隆抗体的优点是 ???? ????。 (3)在胚胎工程中,胚胎移植前,通过 ????技术可获得较多胚胎;移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是 ????。进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的
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