高中生物选修血红蛋白实验题.docVIP

PAGE 1 PAGE 2 11．如今人类已跨入了蛋白质时代，对蛋白质的研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请回答下列问题。 (1)蛋白质的提取和分离一般分为四步：__________、__________、__________和纯度鉴定。 (2)如果要从红细胞中分离出血红蛋白，实验前取新鲜血液要在采血容器中预先加入柠檬酸钠，这样做的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)血红蛋白的提取又可以细分为：红细胞的洗涤、____________________、分离血红蛋白溶液和__________。其中分离血红蛋白溶液时需要用到__________(仪器)分离出下层红色透明液体。 (4)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡必须重新装。这是因为 ________________________________________________________________________。 (5)欲探究色谱柱的高度是否影响蛋白质分离的因素，应把______________________作为自变量，把________________________________________________________________________ 作为无关变量，把____________________________________作为因变量。 答案：(1)样品处理　粗分离　纯化 (2)防止血液凝固 (3)血红蛋白的释放　透析　分液漏斗 (4)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果 (5)色谱柱的高度变化　缓冲液的用量和pH、样品的用量、温度等因素　大小不同的蛋白质分子的间距 12．红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的。我们可以选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题： (1)实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。 ①其中加入柠檬酸钠的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 ②此过程即是样品处理，它应包括红细胞洗涤、________________、分离血红蛋白溶液。 ③洗涤红细胞的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (2)收集的血红蛋白溶液在透析袋中透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是________________________________________________________________________。 ②透析的原理是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 (3)然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。其中通过凝胶色谱法将样品纯化的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 解析：(1)柠檬酸钠是一种抗凝剂，加入柠檬酸钠可以防止血液凝固；样品处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液；洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。(2)透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内，透析可以去除样品中分子量较小的杂质或用于更换样品的缓冲液。(3)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离