FISH和IHC在临床检测HER2基因扩增中的应用.pptx

FISH和IHC技术在检测乳腺癌HER2基因扩增中的应用 内容 HER2扩增的判读标准； IHC与FISH技术联合应用； IHC与FISH结果的一致性。 HER2扩增的判读标准 依据： HER2诊断流程和结果判断 乳腺癌标本一般可先经IHC检测； IHC 3+为HER2阳性； IHC为0和1+为HER2阴性； IHC2+为HER2不确定病例，需进一步应用ISH的方法进行HER2基因扩增状态检测，也可以选取不同的组织块重新检测或送条件更好的实验室进行检测。 IHC的标准 标本类型：(1)手术切除标本；(2)粗针穿刺活检标本；(3)麦默通活检标本(尽限乳腺癌)。 IHC流程：固定-组织脱水和包埋-蜡块选择和切片-脱蜡-杂交-观察。 对照：每次检测时均应设置阳性对照（已知阳性），阴性对照（已知阴性）和空白对照（无样品）。 观察：依照评分标准表进行评判。 IHC标准 IHC标准 IHC标准 乳腺癌 胃癌 IHC标准 IHC注意事项 影响结果的因素： 试剂：HER2探针等； 标本质量：标本离体后尽快固定，固定时间6-72小时，使用新鲜4%甲醛固定，切片厚度3um； 仪器：杂交仪，荧光显微镜等。 IHC注意事项 FISH原理 FISH标准 观察程序： 要求至少找到2个浸润癌区域，计数至少20个浸润癌细胞。 观察HER2和CEPl 7信号，并进行信号计数和比值计算。  FISH标准 IHC