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多参数分选型流式细胞仪(FCM)论证报告 实验室名称：江苏大学医学技术实验教学中心 一、 仪器设备名称：多参数分选型流式细胞仪 二 、仪器设备规格、型号、技术指标及功能 1、设备规格、型号 BD FACS Aria II 2、技术指标及功能 石英杯流动检测池荧光检测灵敏度度及佳，〈125 MESF 可以使用达三根激光：激光波长为488nm、633nm和407nm 获取速度达70,000细胞/秒，分析速度达50,000细胞/秒 多色分析，分析参数可达15色之多 完全数字化电子处理系统，分辨率达262,144道，分选精度达1/32液滴 液流系统车装载鞘液、废液和洗液，液流自动控制系统，软件自动清洗程序 进样仓自动加压，自动混匀样本，自动冲洗进样管路 喷嘴选择70mm或100mm，满足绝大多数细胞分选的要求，喷嘴拆换简便、精确 两管或四管分选，可以使用多种规格的收集管 配件BD ACDU装置，可以在微孔板或载波片上定量分选细胞 软件自动仪器控制和计算分选设置，液滴监控，自动检查堵塞 样本和分选细胞冷却系统 配件BD AMO，工作时控制浮质，避免污染 工作无特殊环境要求，不需要额外辅助设备 流式细胞仪（Flow Cytometer, FCM ）流式细胞术(Flow Cytometry， FCM)是基于流式细胞仪的一种在形态和功能水平上对微粒(包括真核、原核细胞，细胞器以及其他颗粒)进行定量分析和分选的新型技术。流式细胞仪作为一种最先进的细胞定性和定量分析仪器，具有以下特点：①速度快，每秒可测量数万个细胞；②精度高；③准确性好；④多参数测量，可以同时对同一个微粒做有关物理、化学和生物特性的多参数测量；⑤是学科交叉的结晶，它综合了激光、计算机、流体力学、细胞生物学、生物化学、图像分析等领域的知识和成果。 在白血病临床诊断、疗效和预后观察中的应用：白血病等肿瘤细胞个体差异很大，目前除了病理形态学分析和临床症状分析外，流式细胞对白血病的分型是临床诊断白血病重要依据，是国际公认定基本手段之一。随着研究的深入，四参数以下的流式分析已经不能满足临床研究和诊断地要求，迫切需要进行多参数分析白血病细胞的类型，以提高白血病的临床诊断、疗效和预后观察。 在免疫学教学、科研和临床诊断中的应用：FCM 以它的快速、灵活及定量的特点被广泛地应用于免疫学的基础研究和临床应用的各个方面，尤其是结合单克隆抗体技术，在免疫分型、分选、肿瘤细胞的免疫监测、机体免疫状态的监测、免疫细胞的系统发生及特性研究等方面更能起到重要作用。尤其是近年来临床开展的特异性肿瘤疫苗治疗肿瘤的研究和应用，通过流式细胞术结合四聚体标记技术得到了使得临床检测肿瘤疫苗疗效取得了突破性的进展，为临床肿瘤治疗提供了可靠的保障。流式细胞术已经成为现代免疫技术的重要组成部分。 临床分子诊断中的应用：许多疾病的早期诊断尤其是肿瘤的早期诊断是临床迫切需要解决的重大问题，早期发现肿瘤细胞是早期诊断的一个重要手段，但是由于病理学观察很难受主管因素的影响，很难在众多的细胞中发现肿瘤细胞，单细胞PCR技术很好地解决了这个问题，但是要获得单个细胞，目前除了原始的稀释手段，只能依赖于流式细胞仪的分选，因此流式细胞分选在临床分子诊断中具有不可替代和逾越的重要手段。 病原生物学检验诊断中的应用：在病原生物，尤其是细菌的研究，以往大多以生化手段进行手工鉴定，尽管有细菌的自动鉴定仪，但是大量的工作仍然需要手工完成。近年来应用化学发光和荧光标记技术应用于细菌学的研究和临床诊断中，使得细菌学的诊断也逐渐进入自动化时代。 其他生命科学教学和科研中的应用： DNA和RNA的测量和分析DNA和RNA的含量可以用多种荧光探针标记后测出。对细胞内 DNA 含量的测定可用于细胞生物学方面的研究和临床肿瘤学的诊断；测量 RNA 的含量可用于血液中的网织红细胞的检测和计数； DNA 和 RNA 含量的测定可以用于区别细胞周期中的 G 0 和 G 1 期。 蛋白质总量测定用 FCM 可以测定细胞中蛋白的总含量，以检测一个细胞群体生长和代谢的状态，或区别具有不同蛋白含量的细胞亚群，如血液中的白细胞的分类。 特殊配体的测定配体是与不同的细胞结构特异结合很强的各种大分子和小分子，通过对特异性的荧光标记的配体的测定可以获得不少有关结构参量和功能参量的信息。例如用标记的外源凝集素可检测细胞表面糖；用标记抗体可测表面抗原；用标记多聚阳离子可检测细胞表面电荷；用标记的激素、生长因子、神经递质和病毒等可检测细胞受体；用标记的大分子、微生物等可检测细胞的内吞性；用荧光素标记的亲和素以及带有 DUTP 的生物素衍生物的 DNA 探针跟靶细胞的 DNA 杂交能够检测原位的特殊基因等。这方面的应用范围广、有前途，已经成为研究细胞和组织中的抗