基因工程绪论.pptVIP

考核方式 平时课堂提问、作业、考勤占30% 期中考试占10% 期末考试占60%，闭卷考试。 问题： 生物之所以体现出各种形态是基因表达的结果，各种生物间的性状千差万别是为什么呢？ 例： 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 豆科植物的根瘤菌能利用空气中的氮气 人的胰岛B细胞能分泌胰岛素调节血糖的浓度 结论：这些都是基因特异性表达的结果 问题：人类能不能改造基因呢？能不能使本身没有的某个性状的生物具有某个特定性状呢 / / 基因工程学习之分子生物学基础知识 哺乳动物RNA聚合酶II的启动子元件 及其相应转录因子 基本区：确定转录起始点位置，以极低的水平启动转录 辅助区：各保守序列通过与相应的基本转录因子作用而大大提高转录启动 的频率，这些保守序列(如CAAT盒和GC盒等)作用具有双向性 3 操纵子调控模型 A 操纵子调控的基本原理 B 乳糖操纵子 C　色氨酸操纵子 D λ-噬菌体的操纵子 A 操纵子调控的基本原理 操纵子的组成及功能 操纵子的调控网络模式 典型的原核操纵子(operon)结构 操纵子调控的网络模式（1） 依据操纵子对新出现蛋白调节因子的响应机制可分为： 负控制系统： 没有调节蛋白因子存在时操纵子原本是开放的，调节蛋白因子的出现 使该操纵子关闭。该调节蛋白因子称为阻遏蛋白，作用机制是与操作子结 合阻止RNA聚合酶启动转录或与新合成的mRNA结合阻止核糖体启动翻译 正控制系统： 没有调节蛋白因子的存在时操纵子原本是关闭的，加入一种调节蛋 白因子后即可使该操纵子开放。这种调节蛋白因子称为激活蛋白，它与操 作子和RNA聚合酶作用，协助转录的启动。 操纵子调控的网络模式（2） 可诱导操纵子： 小分子物质的出现使其由关闭状态进入开放状态，此过程叫做操纵子 的诱导作用，该小分子物质叫做诱导物。在某些条件下，如调节蛋白编码 基因突变时，可诱导操纵子会变得不可诱导；糖代谢利用操纵子多属此类 可阻遏操纵子： 小分子物质的出现使其由开放状态转入关闭状态，此过程叫做操纵子 的阻遏作用，这种的小分子物质称为共阻遏物。在某些条件下使可阻遏操 纵子无法去阻遏，这种现象称为超阻遏。氨基骸合成的操纵子多属此类 根据操纵子对具有调控基因表达功能的小分子物质的响应机制可分为： B 乳糖操纵子 乳糖操纵子的结构及性质 诱导物与阻遏蛋白的相互作用 阻遏蛋白与操纵子的相互作用 乳糖操纵子的正调控作用 乳糖操纵子的结构及性质 LacY LacZ I DNA Z Y A O P mRNA 阻遏蛋白 pol 没有乳糖存在时 阻遏基因 阻遏蛋白与操纵子的相互作用 大肠杆菌lac操纵子上的对称序列 Lac repressor (阻遏蛋白)与DNA的结合 lac operon上共有三个 repressor 结合位点 mRNA 阻遏蛋白 有乳糖存在时 I DNA Z Y A O P pol 启动转录 mRNA 乳糖 半乳糖 β-半乳糖苷酶 诱导物与阻遏蛋白的相互作用 C 色氨酸操纵子 1. HTH型 (Helix-turn-helix ) 2. Zinc-finger 蛋白 3. Homeodomain 4. Leucine-zipper 5. Helix-loop-helix 基因表达调控的生物学意义 适应环境、维持生长和增殖 维持个体发育与分化 调控程序上的缺陷或紊乱将导致 严重后果 基因表达失控会导致严重后果 2 启动子调控模型 A 启动子的组成及功能 B 启动子的顺式增强作用 C 启动子的反式协同作用 D 启动子结构的多样性选择 2 启动子调控模型 A 启动子的组成及功能 启动子的一般特性 原核生物的启动子 真核生物的启动子 RNA聚合酶结合并启动转录的特异DNA序列 启动子的一般特性 序列特异性 方向特异性 位置特异性 种属特异性 RNA转录起始 -35区 -10区 TTGACA TTAACT TTTACA TATGAT TTTACA TATGTT TTGATA TATAAT CTGACG TACTGT N17 N16 N17 N16 N16 N7 N7 N6 N7 N6 A A A A A trp tRNATyr lac recA Ara BAD TTGACA TATAAT 共有序列 原核生物的启动子 (1) 转录起始位点 (2) Pribnow盒 (3) Sextama盒 (4) 间隔区 典型的细菌启动子组成 真细菌RNA聚合酶的基本特性 核心酶与DNA有与DNA序列无关的松弛性结合 真正识别启动子的是σ因子 σ因子和核心酶在转录中的循环 核心酶随机