化学系-生物氧化教学课件.ppt

电子传递与质子梯度及ATP合成 化学渗透模型 示意图（Chemiosmotic Model) 膜间隙 化学渗透假说模式图（Chemiosmotic hypothesis） Chemiosmotic Hypothesis Mitchell认为: 1.线粒体呼吸链中酶复合体可以产生跨膜质子梯度. 2.质子梯度可以作为能量库储存能量. 3.能量库可以用于驱动ATP的形成. 实验结果: 1.氧化磷酸化需要线粒体内膜保持完整状态. 2.线粒体内膜对H+没有通透性. 3.电子传递确能使H+排到内膜外,ATP的形成又伴随着H+向内 膜的转移. 4.人为建立的pH梯度可驱动ATP的合成. 5.oligomycin的作用. 6. DNP的作用 线粒体中电子传递与ATP的合成偶联 阻断细胞色素氧化酶到O2的电子传递，抑制呼吸和ATP合成 杀黑星菌素或寡霉素抑制ATP合成酶，阻断ATP合成和呼吸作用 解偶联剂DNP的作用机理 质子被带入膜内，打破跨膜的质子梯度。质子梯度不用于ATP形成，P/O下降。 2，4-二硝基苯酚 减肥药 化学渗透模型（Chemiosmotic Model) ATP合酶[ATP synthase ] 位于线粒体内膜的内表面，又称F1/F0-ATP合酶。F1由5种亚基组成，为酶复合物的球状头部，也是活性中心，位于内膜基质表面。F0横贯内膜，含有质子通道，由3种亚基组成。茎部有寡霉素敏感蛋白（OSCP），有调节F0、F1的功能。 ATP合成酶及ATP合成 binding-change mechanism 磷氧比（P/O） 代谢物脱下的氢经呼吸链氧化生成水，一对电子经呼吸链传递到O2生成水所产生的ATP分子的数目（即消耗1克原子氧时由ADP形成ATP的克分子数）称为磷氧比（P/O）。 代谢物脱下的2H经NADH氧化呼吸链被氧化为水时，生成3ATP（P/O?3），而经琥珀酸氧化呼吸链氧化为水时，生成2ATP（P/O?2）。 现在普遍认为，2H经NADH氧化呼吸链被氧化为水时，生成2.5ATP；而经琥珀酸氧化呼吸链氧化为水时，生成1.5ATP 。 影响氧化磷酸化作用的因素 （1）ADP-Pi、ATP的调节作用： ADP/ATP 小，缓慢、表现为抑制作用 ADP/ATP 大，加快、表现为促进作用. （2）激素的调节作用： Thyroxine?(+)Na+、K+-ATPase, 加快 ATP?ADP+Pi, ADP进入线粒体的数量增加，氧化磷酸化加快，耗氧及产热增多——甲状腺机能亢进(hyperthyroidism)，患者BMR(basal metabolic rate)增高。 （3）抑制剂（inhibitors)的作用 A.解偶联剂[uncoupler]的作用,如2,4-dinitrophenol[DNP]。 B.寡霉素[oligomycin]，抑制ATP的形成。 C.CO的作用，与还原型Cyt 氧化酶结合。 D.CN-的作用，与氧化型Cyt 氧化酶结合，生成高铁Cyt 氧化酶,酶失活，电子不能传给O2，呼吸中断。 E. 异巴比妥和鱼藤酮的作用，抑制FP1?CoQ 的传递。 F. Antimycin(antitoxin)A的作用，抑制Cytb?c的传递。 G. 离子载体类抑制剂（ionophores)如缬霉素(结合K+) 呼吸链中ATP的产生与抑制剂 解偶联蛋白（uncoupling proteins, UCPs) 解偶联蛋白是线粒体内膜上参与机体产热的重要转运蛋白质。UCPs被激活时，形成质子通道，可引起线粒体内膜上的质子转运速度加快，使ATP合成依赖的线粒体内膜上的电化学梯度改变，氧化磷酸化被解偶联，不能合成ATP，产能转化为产热。UCPs被认为是参与能量代谢的重要靶蛋白。 机体产热与能量平衡、代谢、体重调节有着密不可分的关系，推测UCPs可能与肥胖、胰岛素抵抗及糖尿病的发生发展相关。但对于UCPs生理功能的组织特异性及其主要的体内的调控因素仍不十分清楚。 目前作为肥胖药物研究的靶蛋白非常热门。 穿梭系统（Shuttle Systems) 有些NADH是在胞液中产生的，而呼吸链位于线粒体的内膜上，线粒体的内膜对NADH不能透过，必须通过一定的转运机制才能保证底物分子脱下的H可以通过呼吸链递氢和递电子被彻底氧化，释放能量。这种转运机制即为穿梭系统，经过穿梭系统把胞液中的NADH转变为线粒体内的NADH或FADH2经呼吸链被氧化。包括磷酸甘油穿梭、苹果酸穿梭。 磷酸甘油穿梭 苹果酸穿梭（Malate shuttle) 腺苷酸和磷酸转位酶 线粒体利用质子推动力合成ATP，但ADP和Pi必须转运到线粒体内，同时合成好的ATP也必须能运出线粒体在细胞质中水解供能。 腺苷酸转位酶(Adeni