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转基因动物的研究及其应用综述 [摘　要]　转基因动物是现代生物技术中一个极其重要的研究领域, 目前已经有转基因小鼠、兔、绵羊、山羊、猪、牛、鸡和鱼等多种转基因动物问世。本文综述了转基因动物应用研究以及所取得的重要成就, 并指出了转基因动物存在的主要问题, 展望了其发展前景。 [关键词]　转基因动物; 基因转移;基因打靶;显微注射；核移植 [中图分类号]　S811. 5　　 转基因动物技术始于 20 世纪 80 年代，近 30多年来，随着研究的深入，转基因动物的研究工作取得了突破性的发展，并且是目前生物技术领域研究的热点之一，具有重大的科学意义和应用价值。这项技术是继连锁分析、体细胞遗传和基因克隆之后的第四项技术。转基因动物是通过向受精卵或早期胚胎中导入外源基因，有目的地对生物的遗传物质基础进行修饰 改造 培育新的品系。若外源基因与动物本身的基因（染色体）整合在一起，外源基因就能随生物的分裂而增殖，在体内得到表达，并能稳定地遗传给后代。 转基因技术是将外源基因通过载体导入受体生物体内，让其获得新特性的一门复杂技术。转基因技术在定向改造生物体中有着无法可比的优越性。随着生物技术的发展 转基因技术相继在微生物、植物、动物中取得了成功。目前，已经有转基因小鼠 兔 绵羊、 山羊 、猪、牛、 鸡和鱼等多种转基因动物问世。 1．转基因动物的研究概况 现代转基因动物研究始于 20 世纪 80 年代以后。1980 年, Go rdon 等[ 1 ]首次获得转基因小鼠。1982 年, Palm iter 等[ 2 ]分别将小鼠金属硫蛋白基因启动子(M T 21)与大鼠生长激素( rGH)结构基因和人生长激素(hGH )结构基因融合并导入小鼠受精卵中, 获得了生长超过正常小鼠的超级小白鼠, 其中一只阳性鼠生后 74 d 的体重达到同窝非转基因小鼠平均体重的1. 87 倍, 这便是著名的“巨型小鼠”事件, 是转基因动物发展史上的一个里程碑。目前除转基因小鼠外, 转基因兔、绵羊、猪及转基因山羊, 转基因鸡[ 3 ], 转基因大鼠及转基因鱼[ 4 ], 转基因牛[ 5 ], 转基因猴[ 6 ]等陆续育成。我国转基因动物研究起步较晚, 但已取得一定进展。中科院发育所与扬州大学合作, 将EPO 基因(促红细胞生成素) 和人乙型肝炎表面抗原(HBSA g)导入山羊, 获得两种乳腺特异性表达的转基因山羊[ 7 ], 同时也获得许多重要的基因重组表达产品[ 4 ], 标志着我国转基因技术进入了新的阶段。 2．转基因动物的原理??? 转基因动物（transgenic animal）指通过基因工程技术将目的基因导入生殖细胞、早期胚胎干细胞和早期胚胎，并整合到受体细胞的基因组中，它们经过各种发育途径形成所有细胞都包含目的基因的个体，称转基因动物（也称个体表达系统）。导入的基因称为转入基因(transgene)，而整个技术则称为转基因技术(transgenic technology或 transgenesis)。利用转基因技术，人们可以在动物基因组特定的位点引入所设计的基因突变，模拟造成人类遗传性疾病的基因结构或数量异常；可以通过对基因结构进行修饰，在动物发生、发育的全过程研究体内基因的功能极其结构功能的关系；可以在动物基因组引入病毒基因组以模拟病毒性疾病的发病过程；可以通过引入具有重要药用价值蛋白的编码基因，使动物成为该药物蛋白的生产场所；可以将所引入的DNA片段作为环境诱变剂作用的靶DNA，通过对它回收后的结构分析，研究诱变剂造成的DNA损伤和诱发基因突变的规律。转基因动物技术不仅在生命科学研究中的应用越来越广，技术本身发展也越来越快，逐步逼近修饰的精确性与可调性。??? 转基因动物技术已经经历了近二十年的发展，从原理、技术及在生命科学研究领域中的应用来看，可将转基因动物研究大致分为以下3个部分：（1）上游部分 克隆目的基因，分析基因的结构并在体外或其他系统中进行功能研究；（2）中游部分：设计遗传修饰策略（包括载体系统的构建等），选择适当的靶细胞进行基因转移和鉴定，在此基础上将遗传修饰由细胞向整体动物过渡，实现对整体动物基因组进行认为修饰的目的；（3）下游部分：按育种程序进行工程动物的选育和建系，在整体动物的背景上对目的基因的功能进行详细的研究，并进一步地开发利用符合设计要求的遗传工程动物。??? 转基因动物的遗传修饰策略包括：（1）导致产生新功能的基因组修饰（gain of function, GOF），主要有普通转基因及基因重复；（2）导致功能丢失的基因组修饰（loss of function, LOF），主要有插入突变、大片段缺失突变、点突变及条件性基因缺失突变；（3）导致基因替换的基因组修饰，主要利用基因打靶技术使替换位点上的内源基因被另一个基因取代，