樟芝真菌深层培养条件研究.ppt

樟芝真菌深层培养条件研究 樟芝亦名牛樟菇、红樟芝，是一种珍稀的药用菌 寄生于台湾特有的保育类树种牛樟树上，生长极为缓慢，自然产量稀少。现代分离技术证实，樟芝中具有防癌、抗癌、提高免疫力的生理活性物质的主要成分为多糖体和三萜类化合物。樟芝多糖中主要含有B．D一葡聚糖，它能够通过刺激巨嗜细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞等增强人体免疫功能，进而达到抗肿瘤的效果。此外，樟芝中尚有多种具有强心、降血压、降血脂、降血糖、抗血栓、降低胆固醇功能以及抗炎作用的成分 1材料和方法 1．1菌株 樟芝真菌：衡水学院生命科学系微生物实验室保藏。 1．2培养基 斜面培养基：PDA培养基 种子培养基：PDA液体培养基 发酵培养基：碳源为葡萄糖3．8％ ，氮源为蛋白胨0．4％，pH值为8．0，酵母膏0．2％、KH2PO4 0．1％、MgSO4·7H2O 0．05％ 、VB1 0．005％ 。 1-3培养方法 种子液的培养：从25℃培养8d的斜面上用接种钩切Icm2带培养基的菌体转入装有150mL种子培养基的500mL三角瓶中，25℃、150r／min培养3d。 发酵培养：将种子以一定的接种量，接入装有一定量培养基的500 mL三角瓶中，25℃振荡培养8d。 7L发酵罐分批培养：发酵罐容积7L，装4．5L培养基发酵培养基中，接种量10％，培养温度25℃，通气量5％--20％ ，pH 自然，搅拌转速100r／min~3OOr／min，培养6d～8d。 1．4检测方法 1．4．1生物量菌体干重的测定 烘干恒重法。 1．4．2樟芝多糖的定量检测 苯酚．硫酸法。 1．4．3菌液的镜检 1．4．4 pH值的测定 pH计测定。 1．4．5还原糖的测定 采用DNS法(3，5．二硝基水杨酸比色法) 1，4．6总糖测定 1．4．7溶氧量的测定 7L发酵罐溶氧电极测定。 2结果与讨论 2．5几种溶氧条件菌体、多糖等对比 樟芝真菌7L发酵罐培养过程中，几种溶氧条件下，菌体、多糖产量到达最大产量的时间等情况见附表。 结论 氧浓度直接影响樟芝真菌菌体生长和产多糖情况。通过调节转速和通气量，将溶氧浓度控制为15％~20％，菌丝体生长较快，还原糖消耗速率和菌体得率明显提高。菌丝体产量和胞外多糖产量分别为7．48 g／L和19．20 eft,。