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致泻大肠埃希氏菌及其检验;一、目的与要求
1、学习掌握致泻性大肠埃希氏菌检验的基本原理和方法;
2、了解动物性食品检验致泻性大肠埃希氏菌的意义。
;二、 生物学特性
俗称大肠杆菌
1、革兰氏阴性菌
2、杆状、两端钝圆、周生鞭毛、无荚膜
3、需氧及兼性厌氧
4、能在普通琼脂上生长;;三、污染途径;四、致病性;物学检验五、微生;(一)检验步骤
检样→样品处理→增菌培养→伊红美蓝(EMB)平板分离培养→生化鉴定→血清学鉴定→报告
;1、增菌培养;2、分离培养;EMB培养基;3、生化检验;三糖铁琼脂试验:只能利用葡萄糖的细菌,葡萄糖被分解产酸可使斜面先变黄,但因量少,生成的少量酸,因接触空气而氧化,加之细菌利用培养基中含氮物质,生成碱性产物,故使斜面后来又变红,底部由于是在厌氧状态下,酸类不被氧化,所以仍保持黄色。而发酵乳???的细菌,则产生大量的酸,使整个培养基呈现黄色。细菌分解含硫氨基酸,产生H2S,与FeSO4发生反应形成FeS。
;靛基质试验:细菌分解蛋白质中的色氨酸产生吲哚,吲哚与对二氨基苯甲醛作用,形成玫瑰吲哚而成红色。;脲酶试验:细菌分解尿素产生两分子氨,使培养基pH升高,指示剂酚红显示出红色,即证明细菌有脲酶。
动力试验:有动力的细菌会沿着穿刺线扩散生长。
赖氨酸脱羧试验:细菌从赖氨酸脱去羧基(-COOH),导致培养基pH变碱,指示剂溴麝香草酚蓝就显示出蓝色,试验结果为阳性,如果细菌不能脱酸,培养基不变则为黄色。;;多价血清;5、结果报告
根据以上生化试验和血清学试验结果作出报告。
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