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非酒精性脂肪肝动物模型造模方法的研究 中西医结合秆霸杂志2002年第13卷第2期 非酒精性脂肪肝动物模型造模方法的研究 张玉峰陈文慧 云南中医学院(昆明,650200) 脂肪肝是由多种疾病和多种病因引起的以肝脏脂肪蓄积 过多为病理表现的一种常见肝病,部分病例可发展为肝纤维 化,甚至导致肝硬化近年来由于生括水平的提高,杖食结构 的变化及预防保健措施的相对滞后,我国由高脂血症,肥胖,糖 屎病,药物损害等引起的非酒精性脂肪肝发病率呈上升趋势. 为深入研究脂肪肝的发病机制,筛选顶防和治疗脂肪肝的有效 药物,探讨药物的作用机理,选择一个与人类病变相似的动物 模型极为重要.近年来t许多学者对利用宴验动物复制非{酉精 性脂肪肝的病理模型进行了大量的研究.本文就国内外对非酒 精性脂肪肝的造模方法及结果作一简要介绍,以便从中把握模 型的动态变化,为今后建立更稳定的模型打下良好的基础 1营养失调性睹肪肝模型 1?l高脂饲料谤发肥胖,高脂血症脂肪肝通过高脂,in/或 高胆圃醇饲料制备脂肪肝模型是最常用的非酒精性脂肪肝模 型大多采用基础饲料加猪油或胆固醇或蛋黄喂养动物,所需 造模周期长,约4～12W,甚至半年,此模型病变有一定发展过 程,与临床高脂血症或肥胖引起的脂肪肝相近.成功率高. 华天懿等…用基础饲料50加l0猪油,10奶粉,30% 鸡蛋组成总能量为16SOKJ/10og的高脂饲料喂养大鼠12W+大 鼠第2w开始体重增长加速,至第4W体重已明显高于对照组 2个标准差,最终体重超过对照组6～7个标准差.肝脂质代谢 紊乱,肝匀浆甘油三百旨(TG),胆固醇(TCH)显着高于对照 组,光镜下可见胞浆内脂滴大小不等.这种通过增加饮食中热 量而形成的动物肥胖与儿童单纯性肥胖症的自然发病过程相 似,对儿童单纯性肥胖症及并发的脂肪肝的防治研究有一定的 意义. Esterbauer等口用基础饲料加I1%玉米油喂养纯种SD幼 年太鼠9W,实验大鼠出现严重的脂肪肝.由于本实验中动物自 由摄食+玉米油组大鼠摄食量高于其他两组,因而它们的脂肪 和总能量的实际摄入量要高于其他组,所以过种模型还有待完 善 祁培宏等以普通饲料喂养大鼠1W,再用古5乳清酸, 10胆固醇,20猪油,1蛋黄粉的脂肪乳剂,每次lml/lO0, 早上用脂肪乳剂t晚上用生理盐水镬胃,时间为4W.结果肝脏 体积变大,湿重增加,色黄,质软而橙脆,切面油腻;HE染色 肝细胞体积明显增大,胞浆内可见脂肪空泡,胞核被推向周边f 苏丹黑B染色见大小不一的黑色脂滴积聚成田I血清,肝脏 TG,TCH显着升高 钟岚等在普通饲料中加2胆固醇,l0猪油,自由戗水 ?123? ? 综述? 进食?3个月后实验动物体重,肝指数(肝湿重/体重×100) 眈正常组显着增高t血TCH和游离脂肪酸(FFA)音量显着增 高t光镜下出现程度不同的弥漫性肝细胞脂肪变性,尤以中央 静脉周围最为明显本模型与人类肥胖薤告并高脂血症I曩脂肪 肝的病例极为相似,可用于血脂调整药物防治动脉粥样性硬化 和脂肪肝的药理研究 范建高等用高脂饲料(2胆固醇,1O猪油,l0玉米 油,78基础饲料)喂养成熟雄性Wistar太鼠,结果6个爿后 大鼠体重,肝重及腹部脂肪重量均显着增加,血清TCH,TG 和肝组织TG古量均显着增高,肝细胞轻至中度脂肪变 Zaman等采用隔离小鼠肝脏摧注的方法.将16.94葡 萄糖,2.46脂肪乳剂及5.2氨基酸组成的乳剂以肠外营养 方式对隔离小鼠肝脏进行灌注,结果8O的肝脏出现脂肪变 性. 1.2禁食后撮入高糖,高淀粉请发的脂肪肝模型Mittend0r— fer等将大鼠禁盘48h后饲以高碳水化台物(81%磷水化台 物,4%脂肪,15蛋白质),结果肝脏甘油三酯音量升高,肝 细胞出现脂肪变性,肝脏脂肪古量上升高达235总细胞色 素P{50(CYP)下降55,提示脂肪聚集与CYP活动碱弱及 CYP蛋白表达减少有关. Natha[ie等将体重240260g的雄性大鼠禁食48h后饲 以高糖高淀粉饮食(40蔗糖,40}:i淀粉,16酷蛋白,4矿 物质和维生索),48h后肝细胞形成轻至中度的巨形空泡脂防 变性,严重打乱了肝实质的小梁形状.肝脏TG水平是正常蛆 的4～10倍. 1,3奎晒外营养(TPN)造成的脂肪肝模型脂肪变性是临康 上TPN常见的并发症Sax等:一利用TPN方式制作r脂脐肝 模型.制作方法为:将大鼠乙醚麻醉后颈内静脉置^内径为 0?9ram硅腔管t导管经皮下从颈后穿出,固定,连接输液装拦, 将鼠放入代谢笼内,允许其自由活动,每只大鼠每天给于非蛋 白质热量2l3-4KJ,氮量为366mg,脂肪乳剂提供35的热量, Z4h恒遣灌注?实验进行7d.结果与对照组相比.肝耻湿重髓 显增加t肝内TG,TCH含量明显增高,光镜下肝纲}f包内空泡 形成