第三章 载基因工程的载体.pptVIP

氯霉素扩增：在抑制蛋白合成并阻断细菌染色体复制的氯霉素存在时，松弛型质粒可继续扩增，其拷贝数可达2000-3000个，称氯霉素扩增效应 基因工程一般只能利用非接接合型质粒，保证分子操作过程中质粒在细胞中的稳定性。 5.根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件 PUC载体的优点： a 具有更小的相对分子质量和更高的拷贝数，平均每个细胞可达500-700个拷贝 第二节 噬菌体或病毒DNA 一、大肠杆菌的λ-噬菌体DNA （2）功能相近的基因在基因组中聚集在一起 目前已经被确定的基因至少61种，一半为必需基因 λ噬菌体基因大致分为4个区： 3、感染周期（溶菌循环） 4、溶源状态的建立 超感染免疫性 插入型载体（insertion vector） 取代型载体（substitution vector） 删除重复的酶切位点:野生型λDNA链上有 5个EcoRI位点和7个HindIII位点，不利于重 组操作，必须删除至1-2个. 为了便于各种来源的DNA片段的克隆，还 需要增加一些单一的酶切位点. 3、灭活某些与裂解周期有关的基因 将无义突变引入噬菌体裂解周期所需的基因， 如将头部包装蛋白基因的CAG突变成UAG。这些 噬菌体只能在具有特异校正基因编码产物的菌株内 繁殖。 当这种λDNA进入一般大肠杆菌菌株后，不能合 成有