体细胞胚胎发生.pdfVIP

第七章 植物体细胞胚胎发生 本章主要内容 体细胞胚胎的概念、特点和意义 影响体细胞胚发生的因素 体细胞胚胎发生的生物学 人工种子 一、体细胞胚胎的概念、特点和意义 概念 离体培养下没有经过受精过程，但经过胚 胎发生和胚胎发育过程所形成的类胚结构，称 为胚状体 （embryoid ）或体细胞胚 （somatic embryo ）。 这一定义有以下几方面的界定： ① 体细胞胚是离体培养的产物，只限于离体培养 范围使用，以区别于无融合生殖的胚； ②体细胞胚起源于非合子细胞，以区别于合子胚； ③体细胞胚经历了胚胎发育过程，以区别于离体培 养中器官发生形成个体的途径。 植物体细胞胚发生的普遍性 愈来愈多的研究表明，植物体细胞在离 体培养中，通过体细胞发生途径形成再生植 株已是极其普遍的现象，并认为该发生途径 是植物体细胞在离体培养条件下的一个基本 发育途径。 特点  普遍性  两极性  生理隔离  遗传性相对稳定  重演受精卵形态发生过程 意义  研究细胞分化、细胞全能性机理的理想实验体系  人工种子的技术基础  体胚可长期保存，利于种质资源保存  遗传性稳定、再生频率高，是理想的遗传转化受体  间接体胚发生过程的无性系变异利于突变体的选择  做为制备原生质体的材料，为细胞分化和植株再生奠定 基础。 二、影响体细胞胚发生的因素 外植体 培养基 植物生长调节物质 培养条件 1、外植体的影响 产生部位： 理论上取自任何部位的外植体都具有细胞全能性， 但许多研究表明某些植物只有某些区段组培效果较 好。目前多以一定发育阶段的合子胚为首选材料。 生理状态： 应采用外植体增殖能力较强时的状态 基 因 型 的 影 响 马铃薯不同基因型体细胞胚形成能力比较 (Seabrook and Douglass, 2001) 2 、培养基的影响 氮源 培养基中氮素的形态亦会显著影响离体条件下的 胚胎发生，体细胞胚的产生要求培养基中含有一定浓 度的还原态氮。多以NH4+的形式供给，椰乳、水解酪 蛋白、酵母提取物以及许多氨基酸也可作为还原氮源。 2 、培养基的影响 碳源 碳水化合物的种类和浓度可以影响体细胞胚的生长 发育，蔗糖是体胚发生最有效的还原碳源。但在一些 试验中，某些糖的培养效果优于蔗糖。还可添加半乳 糖、可溶性淀粉等促进体胚的生长发育。 糖类还可作渗透调节剂对体胚发育或成熟起作用。 2 、培养基的影响 其他重要离子 培养基中钾离子对体胚发生是必需的，它是维持 阴阳离子平衡的主要阳离子。铁也是一个重要元素， 一般以螯合态存在于培养基中。 活性炭 培养基中添加活性炭有利于体胚发育，这在椰枣、 胡萝卜、常春藤等植物的组培试验中都得到证实。 3、激素的调控作用 生长素 生长素对体胚发生具有重要的调控作用，2,4-D是 应用最为广泛的生长素，其次是NAA。2,4-D的作用 具有双重性，一般在体胚诱导阶段必须加2,4-D，在 体胚发生阶段需要降低或取出2,4-D。但有些植物也 并非如此，这与植物本身的内源激素状况有关。 3、激素的调控作用 细胞分裂素 细胞分裂素对体胚的发生是必不可少的。但有 些外植体本身已含有足够的细胞分裂素