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肝细胞癌多种抑癌基因失活机理的研究.PDF
DOI : 10 . 16016 j . 1000 -5404. 1997 . 04 . 012
324 1997 8 A CT A AC ADEM I A E M EDI CIN AE M IL I T A RIS T ER T IA E Aug. 1997
肖文华 刘为纹 吕有勇 高崇峰 () , 6300 38
目的: 。方法: PCR、 So uth ern
22、 53 。结果: 4 1. 7% ( 5 12) 22. 1
pYN Z p Rb pYN Z
, 35% ( 7 20),; 50% p53,
;25% Rb , Rb Cp G
,。结论: ; ,
。
; ;
735. 7
R
: 1. 3. 3 Souther n 10μg DN A, ( 10
, ～ 20 u μg DN A) , 0. 8% , (
[ 1, 2 ] ,
。
,。 ) ,、, 10× SSC
, 80 ℃2 h ; 50%
:
42℃ 12～ 24 ,16～ 24 。2× 、
h h SSC
, 0. 1% SDS20 min× 2, 0. 2× SSC, 0. 1% SD S 60℃
[2 ]
。 30 min, - 70℃3～ 12 d。
1. 3. 4 PCR 10 μl , 100 ng , dNN T P
。 200 μmo l L , M g2+ 1. 5 mmo l L , 10× 1μl, 0. 25
μmo l L () , T aq 0. 3 min。 94℃ 4
1
min30 s,: 94 ℃ 15 s,11 s() , 72 ℃
15 。 , 72℃10 。
1. 1 标本收集及临床资料 s min
2 8 ,4 8 1. 3. 4. 1 V N T R pY N Z22. 1:
, 24,4。5 cm 4 , Ho r n[ 3] 。
5 cm 、11,、 。
1. 3. 4. 2 534 1
13。 RF L P p Rb
, - [ 1]
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