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分子诊断学在临床医学中的应用进展 2011年4月第6恭第2 分子诊断学在临床医学中的应用进展 覃小梅 (广西玉林市第一人民医院检验科,玉林市537000) 【关键词】分子诊断;临床;综述 【中图分类号】R44【文献标识码】A【文章编号】1673-7768(2011)02-0155-03 分子诊断学是以分子生物学理论为基础,利用分子生 物学的技术和方法研究人体内源性或外源性生物大分子和 大分子体系的存在,结构或表达调控的变化,为疾病的预 防,预测,诊断,治疗和转归提供信息和决策依据.分子 诊断学是利用遗传学,病理学,免疫学,生物化学,基因组 学,蛋白质组学和生物信息学的理论和方法,探讨疾病发生 和发展的分子机制,对疾病的诊断,治疗效果的评估,预后 判断及预防等方面都发挥非常重要的作用.现将近年来分 子诊断学的最新研究进展及其在临床医学中的应用进展综 述如下. 1分子生物学的发展概况 分子生物学是研究核酸和蛋白质生物大分子物质的结 构,功能,遗传,调控变化,相互作用和相互关系,从分子水 平上研究和探索生命现象的科学.分子生物学的发展历 程大致分为三个阶段: 1.119世纪后期到20世纪50年代初,是分子生物学诞生 的准备和酝酿阶段.这个阶段对生命本质认识上有两大突 破:一是确定蛋白质是生命的基础,二是确定了DNA是 生物遗传的物质基础. 1.220世纪50年代初到70年代初,是现代分子生物学建 立和发展阶段.这个阶段的主要进展包括::一是发现 mRNA,DNA聚合酶,RNA聚合酶;二是提出DNA半保留复 制机制,操作子学说等重大理论;三是发现遗传密码并证明 其通用性,1966年Nirenberg,Crick和Ochoa等破译了人类 64个遗传密码,建立了生物遗传的中心法则:遗传信息的流 动方向是DNA—RNA-蛋白质,1970年逆转录酶和逆转录现 象的发现使中心法则得以进～步修正完善. 1.31975年Sanger和Gilbert建立了DNA分子中核苷酸 顺序分析法,在这些基础理论和基本技术的基础上,建立了 重组DNA一基因工程技术即分子生物学的核心技术.这 个阶段是初步认识生命并开始改造生命的深入发展阶段, 以基因工程技术的出现作为新的里程碑,标志着人类深入 认识生命本质并能改造生命的新时期开始.这个阶段主要 进展包括:重组DNA技术的建立和发展,基因组研究的发 展,单克隆抗体及基因工程抗体的建立和发展,基因表达调 控机制和细胞信号传导机制研究. 2分子诊断学的发展概况 l55 分子生物学的发展过程,推动着整个生命科学的发展, 也推动分子诊断学的发生和发展.分子诊断学的发展历程 大致分为三个阶段: 2.1分子诊断学的诞生应追溯到1978年,美籍华人 Kan等学者利用液相DNA分子杂交技术对仅一地中海贫 血进行基因诊断,标志着分子生物学技术进入基因诊断时 代.这是分子诊断学的初期阶段,主要利用DNA分子杂交 的方法来进行遗传病的基因诊断,所能检测的遗传病种类 也比较少. 2.21983年发明聚合酶链反应(PCR)技术之后,因为 PCR技术只需要简单的操作就可以在普通实验室条件下大 量扩增靶DNA序列,突破了以往研究中不易获得丰富靶 DNA瓶颈,在分子生物学技术领域引发了一场革命, PCR技术由于操作简便,快捷,适用性强,已广泛应用于分 子生物学领域. 2.3以生物芯片(biochip)技术为代表的高通量密集型技 术.根据芯片上的固定探针不同,生物芯片包括:基因芯 片,蛋白质芯片,组织芯片等.传统核酸印渍杂交存在技术 复杂,自动化程度低,检测目的分子数量少,低通量等不足, 而生物芯片技术是将极其大量的探针同时固定于支持物 上,因此一次可以进行大量检测和分析.生物芯片还可以 进行基因表达谱测定,突变检测,多态性分析,基因组文库 作图及杂交测序.由于生物芯片的工作原理和样品结果处 理方面远远优于传统的检测方法,具有样品处理能力强,用 途广泛,自动化程度高等特点,有广阔的应用前景,生物芯 片的运用已成为分子生物学技术领域的一大热点,大大促 进了分子诊断学科的发展’. 3分子诊断学在临床医学中的应用 由于DNA重组技术,转基因技术,基因组学,蛋白质组 学,基因治疗,生物芯片等技术应用到临床医学领域,对疾 病机理的研究,疾病诊断,治疗和预防产生了深刻影响.分 子诊断不仅能对疾病早期作出确切的诊断,也能确定个体 对疾病的易感性,判别致病基因携带者并对疾病的分期,分 型,疗效监测和预后作出判断…. 分子诊断已经成为实验诊断学的一个重要组成部分, 成为一门新的学科,即分子诊断学.分子诊断的内容从初 156 期的单一诊断遗传性疾病发展到一个全新阶段,广泛应用 于感染性疾病,肿瘤及遗传性疾病诊断等多个医学领域. 当前分子诊断学在临床医学上应用主要有以下