质谱技术在临床微生物检验中的应用.PPTVIP

（四）、操作简便 样品靶板 细菌与基质 飞行管 检测器 质谱图 真空系统 样品靶板 入口 几秒钟即可得到结果 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) MALDI-TOF MS蛋白质指纹特征 MALDI TOF检测 挑取部分菌落点样至靶板 加基质液 生成图谱 搜库鉴定 质谱检测流程 鉴定结果 显示绿色并且分数 最高的为该样品的 鉴定结果。 Bruker的结果报告： 得分范围 分数的解释 2.300-3.000 highly probable species identification 完全可靠地鉴定到种的水平 2.000-2.299 secure genus identification, probable species identification 可靠鉴定到属的水平，有可能鉴定到种的水平 1.700-1.999 probable genus identification 有可能鉴定到属的水平 0.000-1.699 no reliable identification 没有可信的鉴定结果 AnalyteName Organism(best match) Score Organism(second best match) Score Sample1 Pseudomonas aeruginosa 19955 1 CHB 1.906 Pseudomonas aeruginosa DSM 1117 DSM 1.881 Sample2 Proteus mirabilis DSM 18254 DSM 1.774 no reliable identification 1.631 Sample3 Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae 9295 1 CHB 2.064 Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae DSM 30104T HAM 1.994 Sample4 Enterobacter cloacae MB11506-1_CHB 2.299 Enterobacter cloacae 13159_1 CHB 2.072 优点：直接可以打印 缺点：目前没有做接口连接到实验室的LIS系统 与现有传统的鉴定诊断技术相比，具有操作简单、快速、通量高、灵敏度高、准确度好、试剂耗品非常经济等优势。 准确度 时间 成本 MALDI-TOF 90% 5 min 2元 常规方法 80% 5~48 h 50元 对临床的意义： 分级报告，缩短了TAT时间，尤其是厌氧菌、奴卡菌等非常难鉴定的菌提供巨大的帮助。 五、实现血培养的三级报告 微生物诊断技术不断发展给临床带来了什么？ 1、非培养/难培养微生物的检测能力大大提高 2、缩短了常规微生物培养鉴定诊断药敏时间(即TAT时间) 3、从微生物检验角度提供精准的诊断 六、安图微生物质谱Autof ms1000的优势 1、本土产品 维护保养 方便及时 试剂、耗材供应及时 价格便宜 数据库主要包含： 474个属、2613多种、9531株（包含细菌、真菌等） 正在开发的数据库：生物反恐、肠道微生物、海洋致病微生物、肉类蛋白数据库…… 实验室使用心得：成本低，快速，鉴定结果准确，性价比高。 优点1：可以聚类分析，即同源性的研究，在耐药上有优势。 优点2：可以建立库中没有的细菌的数据库，有地域性的数据库。 * 三大特点： 准确 快速 性价比高 * 质谱技术在临床微生物检验中的应用 （一）、现代感染性疾病和 临床微生物检测现状 耐药菌株增多 疑难菌株增多 现代感染性疾病新特点 条件致病菌增多 人员少、鉴定速度较慢 感染菌种类增多 临床微生物当前现状 病原 生长时间 报告时间 需氧菌 24h 2-3个工作日 厌氧菌 48h 酵母菌 2-5天 2-5个工作日 丝状真菌 2-5天 常规微生物检验遇到的困惑： ★呼吸道、肠道标本的细菌种类繁多，常规的鉴定成本高或者操作麻烦， 容易漏掉或者忽视某些细菌。 ★厌氧菌、弯曲菌、分枝杆菌和真菌：细菌鉴定的死角，技术上不好掌 握或者目前的方法难以实施。 ★微生物的分级报告制度：存在很多变数，使得初次报告的结果可靠性 得不到临床的认可。（比如：直接涂片，初步能估计细菌大类，但是 无法确切的到种，和耐药情况。） 实验室要求：操作方便的，成本便宜的，性价比高的，临床迫切需要的。 临床微生物实验室自动化 将实验室人员从一些技术要求较低的、能由仪器完成的工作中解脱出来，提高标本处理效率，缩短TAT时间。  临床的需求…… 安图生物Autof ms1000 MALDI-TOF 革命性 临床微生物 兽医微生物 食品微生物（食品安全与质控） 环境微生物监测 质谱的应用领域 （二）、基质辅助