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-*- 第2节 基因工程及其应用 一 二 一、基因工程的原理 一 二 [预习反馈] 1.判断正误。 (1)所有的限制酶都识别GAATTC序列。( × ) (2)一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列。 ( √ ) (3)限制酶能识别和切割RNA。( × ) (4)DNA连接酶可将黏性末端之间的碱基连接起来。( × ) (5)基因工程中的运载体只有质粒。( × ) 2.若用DNA连接酶将目的基因与运载体两两连接,可能有哪些产物? 答案:目的基因—目的基因、目的基因—运载体、运载体—运载体。 一 二 3.切割目的基因和运载体应用相同的限制酶,请分析这样操作的目的是什么? 答案:用同一种限制酶切割出相同的黏性末端,有利于目的基因与运载体结合。 4.不同生物的DNA能够重组在一起的基础是什么? 答案:不同生物的DNA都是由4种脱氧核苷酸组成的;都是规则的双螺旋结构;都遵循碱基互补配对原则。 一 二 5.下列关于基因工程的叙述,正确的是( ) A.基因工程所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体 B.所有限制酶都只能识别同一种按规定排列的核苷酸序列 C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快 D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功地表达 解析:基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA连接酶。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列。目的基因进入受体细胞不一定能成功表达。 答案:C 一 二 二、基因工程的应用及安全性 一 二 [预习反馈] 1.基因工程育种的原理是什么?与杂交育种、诱变育种相比,基因工程育种的主要优点有哪些? 答案:基因工程的原理是基因重组。基因工程育种的主要优点有育种周期短,能定向改造生物的遗传性状等。 一 二 2.中国农业科学院的科学家继成功培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉后,又成功培育出了抗虫烟草、抗虫玉米、抗虫水稻等多种农作物,下列属于转基因抗虫作物的推广意义的是( ) ①使危害农作物的害虫灭绝 ②农药用量减少 ③环境污染降低 ④农业生产成本降低 A.①②③ B.②③④ C.①②④ D.①③④ 解析:抗虫基因产生对害虫有害的物质,使害虫食用后死亡,从而减少了农药的使用量,降低了农业生产成本,也降低了对环境的污染。 答案:B 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 基因工程的操作工具 限制酶与DNA连接酶作用的部位分别是什么?运载体必须具备哪些条件? 1.EcoRⅠ限制酶只能识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开,产生黏性末端,请写出下列DNA片段被切割后产生的黏性末端。 答案: 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 2.下图表示一段DNA序列,限制酶和DNA连接酶的作用部位是a还是b? 答案:b。 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位, 则相应的酶依次是( ) A.DNA连接酶、限制性核酸内切酶、解旋酶 B.限制性核酸内切酶、解旋酶、DNA连接酶 C.解旋酶、限制性核酸内切酶、DNA连接酶 D.限制性核酸内切酶、DNA连接酶、解旋酶 解析:使氢键断裂的是解旋酶,限制性核酸内切酶使相邻两个脱氧核苷酸的磷酸二酯键断裂;连接DNA片段间磷酸二酯键的是DNA连接酶。 答案:C 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 知识总结与DNA有关的四种酶的比较 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 1.基因工程的基本工具 (1)限制酶 ①作用与特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点切割DNA分子,也就是说限制酶具有专一性和特异性。 ②作用结果:一般产生黏性末端(碱基能互补配对)或平末端。 (2)DNA连接酶 ①催化对象:两个具有相同黏性末端或平末端的DNA片段。 ②催化位置:脱氧核糖与磷酸之间的缺口。 ③催化结果:形成重组DNA。 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 (3)运载体 ①作用:作为运载工具将目的基因转移到宿主细胞中;使目的基因在宿主细胞内进行大量复制。 ②需要具备的条件:能够在宿主细胞中复制并稳定地保存;具备多个限制酶切点,以便与外源基因连接;具有某些标记基因,便于进行筛选。 ③常见的种类:质粒、噬菌体和动植物病毒等。质粒是一种相对分子质量较小、独立于拟核或细胞核之外的环状DNA分子(一般有100~200 kb,kb为千碱基对),存在于许多细菌和酵母菌等生物的细胞中。 探究点一 探究点二 问题导引 典例剖析 归纳提升 活学活练 温故知新 2.DNA连接酶与DNA聚合酶的比较 问题导引 典例
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