水产动物生理学实验讲义.ppt

【方法与步骤】 1、破坏延脑等脑组织。 2、打开腹腔，暴露其内脏。不拨动胃肠道的条件下观察胃肠道运动形式和运动程度。 3、拨动胃肠道之后，再观察胃肠道的运动情况。 4、小心地摘除掉肝脏和胆囊。 5、观察食道左侧迷走神经的走向和分布。分离该迷走神经，穿线备用。 6、电刺激迷走神经，观察胃肠道运动情况的变化。 7、当胃肠道强烈运动时，将肾上腺素溶液滴加在胃肠道上，观其反应。完成后用鱼用任氏液清洗腹腔。 8、当胃肠道运动减弱后，将乙酰胆碱溶液滴加在胃肠道上，观其反应。完成后用鱼用任氏液清洗腹腔。 9、重复第7项内容。 10、按第6项的刺激参数，对胃肠道肌肉直接进行电刺激，观其反应。 实验五 甲壳动物小触角弹动运动  的综合性实验 【目的】了解虾蟹小触角的形态特征、生理作用以及饵料生物提取液对它的刺激作用。 【原理】小触角（第一触角）是虾蟹的嗅觉器官，在感受水中的化学物质、判别食物、寻求异性和确定行为方向等方面具重要作用。每个小触角通常具大量的呈横排排列的化感刚毛。 动物静息期间，小触角能自发的持续弹动，其弹动频率在一定范围内随化学物质浓度的升高而加快，也随化学物质成分刺激作用的大小而变动。用饵料生物提取液及其不同浓度的稀释液来刺激小触角可考察小触角应答反应的变动关系。 【实验内容】 实验1、动物的饲养实验；实验2、刺激溶液的制备与保存；实验3、小触角活动形式的观察；实验4、小触角静息弹动频率的测定；实验5、小触角应答弹动频率的测定；实验6、提取液稀释浓度的变动对小触角弹动频率的影响；实验7、小触角形态学观察。 【实验方案】 按照下列顺序进行实验：实验1→实验2→实验3→实验4→实验5→实验6→实验7。 【各实验的步骤与方法】 实验1、动物的饲养实验 饲养前对动物称重、测量甲长并区分雌雄，作好实验记录。 采用浅水饲养方式，在饲养箱内暂养一周。实验期间，饲养用海水盐度28-35。 饲养箱内铺设10cm厚的海砂。每箱设置2-3个隐蔽室。按常规方式进行饲养管理（投食、换水、清污、测水温、测盐度、观察活动并作好记录）。 饵料系鲜活小杂鱼，其投喂量约为蟹重的5%。每日下午5：00-6：00时投饵，次日上午7：00-8：00时换水清污。 实验2、刺激溶液（试液）的制备与保存 实验1开始后第3天制备刺激溶液。方法：迅速取出贝肉，清除消化道内含物，4℃0.7%盐水清洗，沥干称重。 按1g鲜贝肉加1ml冷盐水比例，制成贝肉匀浆，按3500转/分的转速离心15分钟（按1：1加冷盐水）。 上清液按最终1：9的比例配加冷盐水调制成实验原液，4℃冷藏保存（保存一周）。使用前，将原液稀释成10-6、10-10的稀释试液，分装入2个溶液瓶待用。实验液使用前，将温度升至室温。 实验3、小触角活动形式的观察 将蟹置于盛有干净海水的小实验缸内，对其小触角的活动进行观察，分析各种活动的特点，判断各种活动是否具有规律性，对比左右小触角的活动差别。 通常，蟹类小触角具有弹动、旋转、擦拭和回缩等四种活动形式。 实验4、小触角静息弹动频率的测定 将实验动物置于一个盛有干净海水的透明实验水槽内，在无理化刺激的条件下，人工计数小触角在单位时间内的弹动次数，比较左右小触角弹动频率上的差异（弹动指小触角基节与底节间的屈折运动，小触角基节与底节之间的夹角改变并迅速复位包括不完全复位的全过程为小触角的一个弹动动作）。要求分别记录3次数据。 实验5、小触角应答弹动频率的测定 用吸管吸取实验原液后，将其小心地施加到距某侧小触角1cm远的正上方，当实验液到达该小触角后即开始人工计数第一分钟内该侧小触角的弹动次数（应答性弹动频率）。 计数完毕，立即连续10次彻底更新实验缸内的海水。然后，让动物静息3分钟。按照这样的方法重复进行3次计数。 实验6、提取液稀释浓度的变动对小触角弹动频率的影响 按实验5的方法，依次使用10-10、10-6倍稀释液和原液对小触角进行刺激（3次，并计算其平均数）。 实验7、小触角形态学观察 取下小触角后，置于解剖镜或低倍光学显微镜下观察小触角各部的外部形态特征等。 观察内容：①小触角的组成部分；②小触角的大小与质地；③小触角的分节情形；④内鞭的形态；⑤外鞭的形态；⑥化感刚毛的形态。 水产动物生理学实验 前 言 水产动物生理实验课，是水产动物生理学的一个重要教学环节。 通过实验，使学生进一步理解基础理论，对水产动物机体整体和各部分正常机能活动及其协调性有一个直观认识。 通过实验，使学生掌握相关的基本技能，提高动手能力，培养科学态度，为毕业研究作准备。