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1.下列说法正确的是( )
A.限制性核酸内切酶最初是从人体细胞中发现的
B.限制性核酸内切酶的切口一定是GAATTC碱基序列
C.质粒是基因工程中唯一用于运载目的基因的载体
D.利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制的过程可称为“克隆”
【解析】选D。限制性核酸内切酶最初是从细菌体内发现的。限制性核酸内切酶具有特异性,能特异性切割DNA分子,切口也具有特异性。质粒是最常用的运载目的基因的载体,噬菌体、动植物病毒也可作为载体。利用载体在宿主细胞内对目的基因进行大量复制,这个过程是在分子水平上的克隆。
2.在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具是( )
A.限制性核酸内切酶和连接酶
B.限制性核酸内切酶和水解酶
C.限制性核酸内切酶和载体
D.连接酶和载体
【解析】选A。对基因进行修饰和改造的工具是限制性核酸内切酶和DNA连接酶,分别切割和形成DNA分子中的磷酸二酯键。
3.下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体( )
A.细菌质粒 B.噬菌体
C.动植物病毒 D.细菌拟核中的DNA分子
【解析】选D。作为基因工程载体的一般是质粒、噬菌体和动植物病毒等,不能用细菌拟核中的DNA分子作为载体。
4.不属于目的基因与载体结合过程的是( )
A.用一定的限制性核酸内切酶切割质粒露出粘性末端
B.用同种限制性核酸内切酶切割目的基因露出粘性末端
C.将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处
D.将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
【解析】选D。目的基因与载体的结合过程中,先用同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体,然后用DNA连接酶将二者相同的切口连接起来。D选项是目的基因导入受体细胞的过程。
5.水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中有三种氨基酸构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。在转基因技术中,这种蛋白质的作用( )
A.促使目的基因导入宿主细胞中
B.促使目的基因在宿主细胞中复制
C.使目的基因容易被检测出来
D.使目的基因容易成功表达
【解析】选C。该发光蛋白基因属于标记基因,可用于重组DNA的鉴定与检测,使目的基因容易被检测出来。
6.基因工程又叫基因拼接技术。农业科技工作者在水稻中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该抗病基因导入到水稻中,培养抗病品系。回答以下问题:
(1)在该技术中,用人工合成方法获得抗病基因的途径之一是:以目的基因转录的_____为模板,_____成互补的单链DNA,然后在酶的作用下合成_____。
(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌、_____。
(3)要使载体与抗病基因连接,首先使用_____进行切割。 切割完成后,采用_____酶将载体与该抗病基因连接,连接后得到的DNA分子称为_____。
(4)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是( )
A.淀粉 B.脂类 C.蛋白质 D.核酸
【解析】(1)目的基因的获得有化学合成法和直接从基因文库中获取。人工合成法之一是逆转录法,以信使RNA为模板,逆转录成单链DNA,然后合成双链DNA。
(2)基因工程中常用的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞。
(3)进行目的基因与载体的重组时,先用同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体,然后用DNA连接酶将载体和目的基因(抗病基因)连接,得到重组DNA分子。
(4)基因表达的产物是蛋白质。
答案: (1)信使RNA(mRNA) 逆转录(反转录) 双链DNA(目的基因) (2)动植物细胞
(3)限制性核酸内切酶 DNA连接 重组DNA(重组载体)
(4)C
一、基因工程中几组概念的理解及比较
1.基因、基因文库、目的基因
(1)基因:具有遗传效应的DNA片段,是控制性状的遗传物质的基本结构和功能单位,基因的脱氧核苷酸序列代表遗传信息。
(2)基因文库:含有某种生物不同基因的许多DNA片段,这些DNA片段导入受体菌的群体中通过克隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。
基因组文库:该文库中含有一种生物的所有基因。
cDNA文库:该文库中含有一种生物的部分基因。
(3)目的基因:是基因工程操作中需要的外源基因,它是编码某种蛋白质的结构基因,如生物的抗逆性基因、抗虫基因等。
2.五种酶的比较
对表中五种酶分析如下:
(1)DNA解旋酶作用于氢键,其他各种DNA酶均作用于磷酸二酯键,但作用方式不同。
(2)各种酶作用的(生理)过程
①限制性核酸内切酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶,作用于目的基因的获取和重组DNA分子的形成过程。
②DNA水解酶用于DNA分子的水解,水解产物是4种脱氧核苷酸。
③DNA 解旋酶作用于碱基对之间的氢键,在DNA复制
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