第11章-抗生素类药物的分析(08).pptVIP

第十一章 特 点 1 化学纯度低：同系物多；异构体多；降解物多。 2 活性成分易发生变异：工艺复杂。 3 稳定性差。 青霉素 氨苄西林（氨苄青霉素） 阿莫西林（羟氨苄青霉素） 头孢拉定 头孢羟氨苄 一、 （二）手性C （三）共轭体系 （四）β–内酰胺环 二、 特殊杂质检查 1 聚合物（后面一起讲） 2 有关物质和异构体 3 吸光度 4 有机溶剂 5 结晶性 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 庆大霉素C复合物 庆大霉素C1 R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C2 R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH3 R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3 链霉胍特有反应 四、血清中庆大霉素的HPLC法 血浆样品的预处理 离子对色谱法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干扰 选用OPA为荧光衍生化试剂 采用柱后衍生化法 抗生素类药物中高分子杂质的检查 1定义，来源和分类 抗生素药物中的高分子杂质系对药品中分子量大于药物本身的杂质的总称，其分子量一般在1000-5000. 来源分为外源性和内源性。 2 基本结构和特点 见书 3 检查方法 凝胶色谱法（自身对照外标法） 红色 对二甲氨基苯甲醛 H+ 麦芽酚反应 （三） 链霉糖特有反应 H+ 分子重排 紫红 麦芽酚 （或α-萘酚） 8-羟基喹啉 坂口反应 （四） α -萘酚 （四） 反应 H+ UV法 （五） IR法 （六） 庆大霉素无UV吸收 TLC法 （七） 三、 检查 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 方法 TLC中的对照品法 （BP） 1. 来源 反应中间体 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 规定控制各组分的相对百分含量 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） λmax = 330nm 衍生化原理 1. 1-烷基硫代-2-烷基 异吲哚衍生物 RP－HPLC 方法 2. 规定 C1 25~50% C1a 15~40% C2a +C2 20~50% 计算 3. 峰面积归一化法 三、 含量测定 链霉素、庆大霉素 微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养 基内的扩散作用量反应平行线原理 的设计，比较标准品与供试品两者 对接种的试验菌产生抑菌圈的大小 ，以测定供试品效价的一种方法。 2、 与H2SO4 - HNO3反应 头孢菌素类 3. 茚三酮反应 △ α-氨基 α-氨基、伯胺 某些羟基胺类 酮式 烯醇式 茚三酮 茚三酮 缩合 蓝紫色 4. 双缩脲反应 β-内酰胺类 （开环分解） 似肽键 蓝紫色 5. 与变色酸-硫酸反应 活泼“-CH2-” 青霉素 阿莫西林 氨苄西林 △（分解） 变色酸 显色 150℃ （缩合） （缩合） 6. 与重氮苯磺酸反应 （偶合） 酚羟基 头孢哌酮 （偶合） 光谱法 （四） 1、 UV法 样品、分解产物 头孢氨苄 λmax = 262nm 青霉素V钠 A280nm/A264nm = 1.30～1.50 2、 IR法 β-内酰胺环 酰胺 色谱法 （五） 1、 TLC法 对照品对照法 2、 HPLC法 三、 含量测定 HPLC法 （五） ChP 头孢菌素类 内标法＋校正因子 外标法 特点 快速、高效、灵敏 专属性强、重现性好 一法多用（鉴别、检查、含测） 哌拉西宁 原料药 含量测定 色谱条件 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇–0.2mol/L磷酸二氢钠溶液–10％氢氧化四乙基铵溶液–水（400︰50︰3︰547）用磷酸调节pH值至5.5为流动相。检测波长为254nm。 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素 双氢链霉素 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素 链霉素 苷元 糖 链霉双糖胺 链霉