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基因工程的诞生 一、遗传密码的单位: 二、遗传密码的基本特点 基因工程诞生的标志 基因工程的诞生(一九七三年) 综合S.Cohen 和P.Berg创造性的研究成果,“ 在细胞外,把目的核酸分子与载体核酸分子组合成新的遗传物质,再把它导入原本没有这种物质的细胞内,并使这种重组遗传物质在细胞内的无性繁殖获得成功”,这一工作内容定义为基因工程,世界上第一次完成这项工作内容的1973年被公认为基因工程诞生的元年。 基因工程诞生与相关学科之间的关系 * 无数科学工作者 辛勤劳动的成果 集体智慧的结晶 基因工程发展史的某些重要事件 年 份 重 要 事 件 1869 F.Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离到DNA 1909 W.Jonhannsen创造了基因(gene)一词 1944 O.T.Avery等人在肺炎链球菌转化实验中发现遗传信息的携带者是DNA而不是蛋白质 1952 A.D.Hershey和M.Chase证明T2噬菌体的遗传物质是DNA 1953 J.D.Watson 和F.H.C.Crick提出了关于DNA分子结构的双螺旋模型 1957 A.Kornberg在大肠杆菌中发现DNA聚合酶I,现在这种酶已在基因工程中广泛应用制备探针 1958 M.Meselson 和F.W.Stahl提出了DNA半保留复制模型 1959-1960 S.Ochoa发现RNA聚合酶,它可在单链DNA表面合成RNA分子;发现信使RNA,并证明它携带的遗传信息决定着蛋白质分子中的氨基酸顺序 J.Marmur 和P.Doty发现DNA复性现象,确立了核酸杂交反应的特异性和可行性 1961 M.W.Nirenberg等人应用合成的信使RNA分子[poly(U)]破译出了第一批遗传密码 F.Jacob 和J.Monod提出了调节基因表达的操纵子模型 1964 C.Yanofsky 和S.Brenner等人证明,多肽链上的氨基酸顺序同其编码基因中的核苷酸顺序存在着共线性(colinear)的关系 1965 实验证明细菌的抗药性通常由一类叫做“ 质粒”的小型额外染色体携带;S.W.Holley完成了第一个酵母丙氨酸tRNA的核苷酸全序列测定 1966 M.W.Nirenberg, S.Ochoa 和H.G.Khorana共同破译了全部的遗传密码 1967 发现了可将DNA链连接起来的DNA连接酶 1970 H.O.Smith, K.W.Wilcox, T.J.Kelley分离到第一种限制性核酸内切酶,它可以在特定的位点将DNA分子切割开来 H.M.Temin 和D.Baltimore 在RNA肿瘤病毒中发现反转录酶,在真核生物基因工程中起到巨大作用。 基因工程 诞生的基础 理论上的三大发现 第一,发现了生物的遗传物质是DNA不是蛋白质。 第二,明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机理。 第三,破译了具有通用性的遗传密码。 1934年Avery等人在美国的一次学术会议上首次报道了肺炎球菌(Diplococcu spneumonas)的转化。超越时代的科学成就,往往不容易很快被人接受,Avery的成果没有得到公认。事隔10年,1944年这一论文才得以公开发表。事实上,Avery的工作不仅证明DNA是生物的遗传物质,而且还证明了DNA可以转移,并把一个细菌的性状传给另一个细菌,理论意义十分重大。正如诺贝尔奖金获得者Lederberg指出的,Avery的工作是现代生物科学的革命开端,也可以说是基因工程的先导。 第一,发现了生物的遗传物质是DNA不是蛋白质。 遗传物质? 核酸 或 蛋白质?核酸! O.T.Avery及其合作者,1944年发表了关于细菌转化实验的报告 格里菲斯的肺炎链球菌转化实验 爱弗莱 证实 转化物质 是 DNA 随着生物化学的发展,蛋白质、核酸等生物大分子逐渐分离、纯化出来。各方面的实验证据表明,基因的化学本质不是蛋白质,而是 DNA。格里菲斯的实验证明遗传物质可以转化进入细菌,改变细菌特性。爱弗莱的实验证实,进入细菌改变特性的遗传物质是 DNA,而不是蛋白质。 遗传物质是DNA 分别用放射性同位素标记噬菌体 35S- 标记蛋白质 32P- 标记 DNA 35S 标记外壳蛋白质,感染后放射标记不进入大肠杆菌细胞 32P 标记 DNA ,感染后放射标记进入大肠杆菌细胞 第二,明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机理。 1
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