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一.目的要求:1、明确培养基的配制原理2、通过对培养基的配置、学习和掌握配置培养基的一般方法和步骤 3、了解消毒和灭菌的原理、并掌握各种灭菌的方法和操作步骤 二.实验原理: 培养基是人工配置的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的培养基配制,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或累积代谢产物。 培养基的分类根据培养基的成分、状态和用途不同可以进行不同的分类①?按成分不同分: 天然培养基 合成培养基 半合成培养基② 按物理状态不同分 固体培养基 半固体培养基 液体培养基③ 按用途分: 基础培养基 营养培养基 鉴别培养基 选择培养基 实验内容: ① 配制牛肉膏蛋白胨培养基200ml,分装到5只试管做斜面; ② 剩余的培养基倒入三角瓶中,统一灭菌 ③ 制作棉塞5只; 作业与思考: 1.培养不同的微生物可否用同一培养基? 2.配置培养基为何要调pH值? 3.培养基配置的几个主要步骤是什么? 4.图示并说明移液管,培养皿,试管消毒灭菌前的包扎。 六、 实验报告 1. 记录你所配制培养基的名称、数量、图解配制过程及注意事项 2. 记录高压蒸汽灭菌的操作过程和注意事项 3.准备灭菌用的物品:无菌试管6只、无菌培养皿11套、无菌移液管6只(1ml)、6只(5ml或10ml) 4.无菌水200-300ml 马铃薯培养基的配置: 马铃薯:20g 蔗糖: 2g 蛋白胨:0.4g 水 100ml PH 自然 方法:马铃薯去皮,削成片、煮沸30分钟、纱布过滤、加糖和蛋白胨琼脂、补足水分、121度、灭菌30分钟。 * * 三. 实验方法和步骤 1. 目的明确: 明确所配制培养基的用途,配方,数量并进行相应的计算;清楚所需要的灭菌条件。 2. 配制过程和方法(以牛肉膏蛋白胨培养基为例): 称取药品 → 加热溶解 → 调pH值 → 过滤 →分装 →加棉塞 → 包扎 → 灭菌 → 摆斜面 → 无菌检察 3. 其他培养基的配制: 高氏1号培养基,察氏培养基,马丁氏等培养基的配制方法见教材附录 注意药品加入的次序避免起沉淀反应,避免药品结块,以及配备储备液等等。 四、 消毒和灭菌 化学药品灭菌法 物理灭菌法 五、 附录: 棉塞的制作方法 方法1:过程及图解 方法2: 过程及图解 *
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