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- 2019-08-15 发布于安徽
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CCL2 在白血病细胞中的生物学作用的研究 中文摘要
CCL2 在白血病细胞中的生物学作用的研究
中文摘要
第一部分 CCL2 基因慢病毒载体的构建
目的:构建趋化因子配体2 (chemokine (C-C motif) ligand 2 ,CCL2 )基因的慢病
毒表达载体,为研究该基因对白血病细胞的生物学作用奠定基础。
方法:1.利用聚合酶链式扩增(PCR )技术,扩增出 CCL2 基因的CDS 区,与
pMD19 载体进行连接,阳性克隆送至公司测序。2.利用基因重组技术构建慢病毒载
体质粒CCL2-PLVX ,利用PLVX 、PLP-VSVG 、plp1 、plp2 慢病毒质粒包装系统,
在293T 细胞中采用磷酸钙沉淀法包装CCL2 慢病毒后侵染THP-1 细胞,提取基因
组DNA 为模板,PCR 扩增CCL2 基因。
结果:所获 CCL2 基因经测序与 GenBank 比对序列一致。慢病毒载体质粒
CCL2-PLVX 经双酶切鉴定片段大小正确。包装的慢病毒颗粒侵染 T
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