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实验一显微镜的使用与植物细胞观察 实验内容 1.实验室规则 2.实验报告书写 3.临时装片制作 4.洋葱表皮细胞观察 5.叶绿体观察 6.作业画图 实验室守则 1.组织纪律严格遵守,整洁,卫生,水电门窗。 2.爱护仪器设备标本等。 3.实验前 必须预习本次实验,明确实验的目的要求、内容、方法和步骤。备好教科书,绘图用具(HB、2H铅笔各一支,橡皮、尺子等)和实验记录本。 3.实验时 观察,思考,记录。 4.实验完 按时交实验报告。 实验报告书写要求 1.绘图 HB铅笔 2.格式 【目的要求】、【仪器试剂】、 【实验材料】、【实验内容】、 【实验画图】 3.按要求时间及时交实验报告 4.占30%成绩 【目的要求】 1.掌握光学显微镜使用与保养 2.了解显微镜的类型与结构 2.学习“临时装片法”及绘制“植物细胞图” 的基本技术 3.掌握植物细胞的基本结构 【仪器试剂】 显微镜、载玻片、盖玻片 尖头镊、解剖针、刀片、剪刀 吸水纸、擦镜纸、弯盘、表面皿 水合氯醛、稀甘油、碘试液、蒸馏水等 显微镜的使用 1、取镜和安放 2、对光 3、安放玻片(切片) 4、调焦 5、观察 6、整理(低倍镜找,高倍镜观察) 7、归还显微镜(注意事项) 光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片,待观察植物材料需切成很薄的切片,才能在显微镜下观察。 显微镜的制片分永久制片和临时制片,永久制片的制作方法和步骤复杂。 在教学过程中,要求同学们做的主要是临时制片。 下列是实验常用器材 指用刀片把植物新鲜材料切成薄片,封藏于水中即可观察(临时水装片),通常不经染色或简单染色。亦可经脱水与染色制成永久制片。 优点:临时水装片简单方便;不经化学药物处理,基本保留了植物活体的状态。 材料不能太大,表面不超过3-5mm。关键是平而薄,无需很完整,只需一角就够了。 临时制片种类很多,包括涂片、压片等等 操作过程 一般用左手的大拇指、食指和中指3个手指拿住材料,使材料略突出在指尖之上,避免切片时割伤手指;用右手平稳地拿住刀片,把刀口放在经解剖刀削平的材料平面中间,轻轻地压住它,以均匀的动作,从刀片刀口下方起,斜着向后拉切。切时用臂力而不是腕力,且不必太用力,否则就不易切薄。 在切的过程中,决不能以刀片直接挤压材料,或以刀片来回拉割材料,并且要始终保持材料与刀片在水平状态,否则会由于切面偏斜而影响观察。 切片应该薄而透明,形状不要求非常完整,可用刀不同部位一次作几个切片,然后用蘸水的毛笔取下切片,置于盛水的培养皿中,备用。??????? 柔嫩的器官,例如幼叶,难以直接拿住进行切片,需借助一些维持物。一般用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物,把要切的材料夹于其中,进行切片,以利于把握操作。 将切下的薄片放在载玻片上时,要先在玻片中央加一滴水,把材料放到水滴中,然后用镊子夹住盖玻片,将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴,然后用镊子顶住盖片的另一侧,慢慢放下,使盖玻片与载玻片之间充满水,如有气泡,要掀起盖片,重新放置。???????? 徒手制作的切片可以直接在光镜下观察,也可以经过简易的组织化学染色,以使结构看得更清楚,同时可观察到细胞各部分的化学成分。 常用的染料有:0.1%亚甲基蓝、0.5%~1%中性红或1%番红水溶液等。 染色的方法是将切片放在载玻片上后,用吸水纸吸去多余的水分,滴上一滴染料,经过1~2min后,用水冲洗一下,盖上盖玻片,在显微镜下观察。 植物细胞的构造 将临时装片放在低倍镜下观察,可看到许多无色透明的稍长形的细胞,彼此紧密相连,没有细胞间隙。在细胞中,可见到浸埋在细胞质中的圆形的细胞核,如不清晰,可由盖玻片一侧加稀碘液一滴,用吸水纸在另一侧稍吸;使碘液布满整个标本而染色,几分钟后观察,可见细胞质被染成浅黄色,细胞核被染成较深的黄色,细胞各部分显得较为清晰.移动装片,选择几个较清楚的细胞置于视野中央,换用高信物铙再仔细观察;注意识别下例各部分: 植物细胞结构光镜下分为四个部分 (1)细胞壁 植物细胞所特有。为细胞的最外层, 比较透明。调节细调焦螺旋和光圈、可见两细胞间实际上为三层;,两侧为相邻两个细胞的细胞壁;中间是两个细胞共有的胞间层。 (2)细胞膜 光镜下不易分辨。 (3)细胞质 无色透明胶状物,紧贴在胞壁内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显。 (4)细胞核 埋在胞质内,贴近胞侧壁呈扁圆形或球形。仔细观察,可见包在细胞核外面的核膜,细胞核内有1—3个发亮的颗粒,即核仁。(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破,只剩一半了) (5)液泡:位于细胞中央,占细胞体积的大部分(洋葱表皮细胞占95%),由于液泡内充满细胞液;所以比细胞质更透明。有的细胞含有大量的花
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