光合细菌G3菌固定化保存方法.pptVIP

L/O/G/O 沼泽红假单胞菌（PSB） PSB简介 PSB的固定化保存方法 固定化G3菌的应用 存在问题 4 1 2 3 沼泽红假单胞菌简介 沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris) 是红假单胞菌属（Rhodopseudomonas）的一种，因其细胞内含有丰富的蛋白质、氨基酸、维生素、促生长因子、抗病毒活性因子和辅酶Ｑ及多种生理活性物质,并具有抗脂质过氧化、改善水质，培养饵料生物，防治疾病，提高成活率，制取氢气等功能.目前,我国在种植业、养殖业以及环境保护等方面已广泛应用。 但生产厂家经常会碰到生产菌种的退化、生产菌种纯度不高和生产菌种保藏时间短等问题。我们在筛选纯化、菌种复壮以及保藏菌种方面做了一点工作，尤其是生产菌种保藏方面，我们利用硫酸铝钾做絮凝剂，海藻糖做菌种保护剂，陶瓷粉做菌种固定剂，将液体光合细菌进行固体化保存，既可以延长光合细菌菌种的保存时间，又降低成本，操作简便，节省空间，便于运输，为生产性光合细菌菌种的保存提供了一种新方法。 固定化光合细菌生长情况 经过固定化保存的光合细菌比相同接种量的液体光合细菌生长旺盛，颜色较液体光合细菌较深。 固定化有效活菌数 表1 不同温度下固定化光合细菌有效活菌数 经固定化保存的菌种有效活菌数都较好，其中4℃和-20℃的有效活菌数比常温下保存的活性要强，都达到了2.20×108说明固定化光合细菌在低温下保存的活性和稳定性都高于常温下保存。 保存天数 不同温度下有效活菌数//个:g 常温 4℃ -20℃ 30d 1.73×108 2.20×108 2.20×108 相同接种量的液固体光合细菌比较 表2 相同接种量的液体与固定化 光合细菌的比较 样品 OD660 液体 固定光合细菌 常温 4℃ -20℃ 样品1 1.98 2.16 2.22 2.24 样品2 1.98 2.16 2.20 2.24 样品3 1.98 2.16 2.22 2.24 不同保存条件对有效活菌数的影响 （表3） 有效活菌数（×108cfu/ml） ? 固 定 前 11.30±2.94 ? 固定后 温度 海藻糖//g:L 0个月 2个月 4个月 6个月 8个月 10个月 12个月 常温 0 0.98±0.56 — — — — — — 1 10.30±4.68 0.64±0.41 — — — — — 10 10.30±4.68 0.69±0.17 — — — — — 4℃ 0 0.96±0.29 0.14±0.03 0.01±0.00 — — — — 1 10.30±4.68 9.77±5.60 9.60±2.94 8.60±4.09 4.37±0.92 2.63±1.33 0.98±1.33 10 10.30±4.68 10.30±4.68 9.60±2.94 8.07±4.85 5.37±2.34 4.17±3.38 2.99±2.07 -20℃ 0 0.96±0.29 0.08±0.03 0.01±0.01 — — — — 1 10.30±4.67 9.600±2.94 9.10±6.76 7.07±5.20 4.83±2.66 1.13±0.29 0.65±0.56 10 10.30±4.68 9.58±5.92 9.23±6.53 7.70±5.40 4.70±3.31 3.83±0.92 0.96±0.29 在不同温度保存下，生长周期也有所不同,-20℃菌种颜色首先变红,4℃次之，常温最慢。在660nm下，固定化的光合细菌吸光值比液体光合细菌大。液体菌种的光合细菌按15%量接种，生长较快，一般7d达到稳定期。经固定化后的光合细菌，按相同接种量接种，其生长周期明显延长，一般30d菌体颜色发生变化。说明固定化光合细菌在培养液中有缓释过程，经过缓释后的菌体生长比未固定的菌体生长繁殖旺盛。 固定化G3菌在特种水产养殖上的应用 我国自上世纪八十年代始，将光合细菌应用于水产养殖中。目前光合细菌已经被广泛应用于海、淡水鱼类、虾类以及贝类等的育苗、养殖以及轮虫等饵料生物的培养工作中。 光合细菌的菌种问题以及菌液的纯度问题是影响其应用的首要因素。我们在南通中洋集团的特种水产养殖-河鲀进行试验，研究不同剂型光合细菌的优点和缺点，并探讨光合细菌在水产养殖中的作用方式。 研究内容 选取4个露天养殖池（每个养殖池大小8亩、水深约150cm）试验达中试规模，考察不同养殖池养殖个体的生长情况，分析其肠道消化酶活、肝体比、免疫指标、病害以及鱼体生长情况等指标；结合不同养殖池的水质变化、换水量、投饵量等指标的差异，研究不同剂型光合细菌的优点和缺点，