细胞生物学研究法.pptVIP

第二章.细胞生物学研究方法 显微成像技术 细胞化学技术(cytochemistry) 细胞培养和细胞融合 分离技术 分子生物学方法 显微成像技术 光学和电子显微镜成像原理 三个基本要素:①照明系统， ②被观察的样品，③聚焦和成像的透镜系统 常用的光学显微镜 普通双筒显微镜(binocular microscope) 荧光显微镜(fluorescence microscope) 相差显微镜(phase contrast microscope) 暗视野显微镜(dark field microscope) 倒置显微镜 光学和电子显微镜的基本结构 分辨率(resolution) 　R = 0.61 λ/n Sinα n=聚光镜和物镜之间介质的折射率. 空气为1. 油为1.5; α=样品对物镜角孔径的半角， sinα的最大值为1; λ=照明光源的波长。 0.61是一个恒定的参数，表示成像的点虽被重叠但仍能被区别的程度 数值孔径越大，进入物镜的光越多；介质的折射率越大，则数值孔径越大，这些都可以使分辨率提高 电子显微镜与光学显微镜的基本区别 细胞化学技术(cytochemistry) 酶细胞化学技术(enzyme cytochemistry) 通过酶的特异细胞化学反应来显示酶在细胞内的定位 免疫细胞化学技术(immunocytoche