微生物的代谢调节和代谢工程.pptVIP

第三章微生物的代谢调节和代谢工程(二) ;*;第四节 分支生物合成途径的调节; 在有两种或两种以上的末端产物的分支合成代谢途径中，调节方式较复杂，其共同特点是每个分支途径的末端产物控制分支点后的第一个酶，同时每个末端产物又对整个途径的第一个酶有部分的抑制作用。 分支代谢的反馈调节方式有多种。 ;1、同工酶的反馈抑制 isoenzyme feedback inhibition ; 其特点是：途径中第一个反应被两个不同 的酶所催化，一个酶被H抑制，另一个酶被G抑制。 只有当H和G同时过量才能完全阻止A转变为B。;2、协同反馈抑制concerted feedback inhibition ;例如，荚膜红假单胞菌中天门冬氨酸族氨基酸生物合成途径中，天门冬氨酸激酶(AK)是受末端产物赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制。;3、累积反馈抑制cumulative feedback inhibition;4、增效反馈抑制cooperative feedback inhibition;*;6、联合激活或抑制调节;肠细菌氨甲酰磷酸合成酶的联合激活和抑制;第五节 能荷调节;1、能荷调节(Energy Charge Regulation); 糖代谢的调节主要受细胞能荷的控制。;能荷不仅调节形成ATP的分解代谢酶类（如磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶、柠檬酸合成酶等）的活性； 也调节利用ATP的生物合成酶类（如柠檬酸裂解酶、磷酸核糖焦磷酸合成酶等）的活性。 ;第六节 代谢调控;? 但是，在工业生产中却往往需要单一地积累某种产品，这些产品的量又经常是大大地超出了细胞正常生长和代谢所需的范围。;*;实现代谢控制发酵的方法;1、发酵工艺条件的控制;“添加诱导物或其类似物”;2、改变细胞透性; 采用生理学或遗传学的方法，改变细胞膜的透性。 1、生理学方法 谷氨酸发酵生产生物素的浓度的控制； 添加青霉素； 表面活性剂 2、遗传学方法 营养缺陷型菌株。如谷氨酸生产菌的油酸营养缺陷型，控制油酸，细胞膜合成不完整。;26;3、菌种遗传特性的改变;1、抗反馈突变菌株;2、营养缺陷型菌株;30;第七节 次级代谢与次级代谢调节;初级代谢 微生物从外界吸收各种营养物质，通过分解代谢和合成代谢生成维持生命活动的物质和能量的过程。 ;次级代谢 次级代谢是在一定的生长时期（一般是稳定生长期），微生物以初级代谢产物为前体合成的对微生物本身的生命活动没有明确功能的物质的过程。 ;1、次级代谢的调节类型;（1）、酶合成的诱导调节;（2）、反馈调节; 次级代谢产物的自身反馈抑制和反馈阻遏; 分解代谢产物调节 ;防止碳分解代谢阻遏或抑制的发生; 氮分解代谢产物的抑制作用 以铵盐作为链霉素产生菌的唯一碳源，可抑制链霉素的合成。 避免使用高浓度的铵盐作氮源以防止氮代谢阻遏的发生，是抗生素工业成熟的经验。 ; 初级代谢产物的调节;42; 磷酸盐调节;2、常用的提高次级代谢产物产量的方法 ;（1）、补加前体或其类似物 在合成途径已基本清楚的条件下，向发酵培养基中补加前体是增加次级产物的有效方法。 如青霉素G的生产中，苯乙酰-CoA是限速性因子，补加苯乙酸或其衍生物都能增加青霉素G的产量。;（2）、加入诱导物 把一些对次级代谢产物产生有诱导作用的物质加入发酵培养基中会增加产量。 如加蛋氨酸或硫脲可使顶头孢霉增产头孢霉素C，加入巴比妥可提高利福霉素产量等。 但在工业生产中还未普遍应用此技术，而只是在选择培养基组成时给以考虑。 ;（3）、防止碳分解代谢阻遏或抑制的发生 青霉素发酵中限量流加葡萄糖(或糖蜜)以减少碳分解阻遏的发生，是一项很有效的提高产量的方法。 使用寡糖、多糖等缓慢利用的碳源能减少碳分解阻遏的发生。 加入影响糖代谢的硫氰酸苄酯可使金霉菌对葡萄糖的利用速度减缓，可增加金霉素的产量。 ;（4）、防止氮(磷)代谢阻遏的发生 避免使用高浓度的铵盐做氮源，以防止氮代谢阻遏的发生，是抗生素发酵工业生产中比较成熟的经验。在抗生素产生期如补加氮源则会造成发酵逆转，返回生长期，抗生素的产量会大为减少。 ;*;（5）、筛选耐前体或前体类似物的突变株 加入前体有提高次级产物产量的效果；但过量对菌体又会有毒。筛选对前体有抗性的突变株可以减少或消除前体的反馈阻遏，从而可获得高产。 如抗苯乙酸的青霉突变株，其青霉素的产量会增加。;（6）、选育抗抗生素突变株 链霉素、氯霉素、金霉素筹多种抗生素都具有抑制产生自身菌体蛋白质的能力。一株高产抗生素产生菌，必然应具备对自身所分泌的抗生素的抗性