口腔拭子在药物性耳聋基因检测中的应用.pdfVIP

第4 1 卷第5 期 温 州 医 学 院 学 报 Vol.4 1 No.5 第4 1 卷 第5 期 2 0 1 1 年9 月 Journal of Wenzhou Medical College Sep .20 11 ·论 著 · 口腔拭子在药物性耳聋基因检测中的应用 1 2 1 1 1 2 张琼敏 ，郑静 ，宋攀攀 ，朱翌 ，陈晓云 ，管敏鑫 （1.温州医学院附属第一医院 耳鼻咽喉科，浙江 温州 325000；2.温州医学院 生命科学学院， 浙江 温州 325035） [摘　要]目的：探讨口腔黏膜上皮细胞基因组DNA在药物性耳聋基因A1555G及C1494T突变检测中的应 用，寻求基因检测中更简单快捷并无损的样本来源。方法：采集97例来自温州特殊教育学校非综合征型 耳聋学生的口腔拭子和外周血，分别提取基因组DNA，进行浓度与纯度的测定、基因扩增及产物测序，比 较2种样本来源及2种方法提取的基因组DNA的浓度、纯度、扩增成功率，并将测序结果与人类线粒体DNA 剑桥参考序列进行比对。结果：口腔拭子DNA的手工法提取浓度 （42.5±41.7）ng/mL与试剂盒法DNA浓 度 （44.8±43.4）ng/mL差异无统计学意义 （P0.05）；手工法DNA纯度 （1.45±0.73）低于试剂盒法 （1.87±0.87），两组间差异有统计学意义 （P0.05）；二者扩增成功率与外周血差异均无统计学意义 （P 0.05）；口腔拭子DNA的药物性耳聋基因扩增产物长短一致，测序结果完全相符，均显示A1555G突变阳 性2例，阴性95例；C1494T突变97例均阴性。结论：无损性样本口腔拭子扩增成功率高，诊断结果可靠， 可替代外周血作为药物性耳聋基因检测的DNA来源，具有一定的临床应用价值。 [关键词] 无损性；口腔黏膜拭子；药物性耳聋；基因检测；基因扩增 [中图分类号] R394.33[文献标识码] A [文章编号] 1000-2138（2011）05-0409-04 Applications of genes extractedfrom buccal swab for screeningmitochondrial DNA A1555G and C1494T mutation ZHANG Qiongmin*，ZHENG Jing，SONG Panpan，ZHU Yi，CHEN Xiaoyun，GUAN Minxin.*Department of ENT， ， Wenzhou，325000 Abstract: Objective: screening mitochondrial DNA A1555G and C1494T mutation， - invasive kind of gene source.Methods: and sequence the DNA from the two different kinds Results: （42.5±41.7）ng/L had no statistically difference from that via Reagent kits（44.8±43.4）ng/L（P0.05）.The purity of the former（1.45±0.73）was lower than that of thelater（1.87±0.87）（P0.05）. The -eral blood（P0.05）