骨髓细胞化学染色.pptVIP

骨髓细胞化学染色 细胞化学染色是以细胞形态学为基础，利用化学反应原理，对细胞中的酶类、脂类、糖类及蛋白质等化学物质进行定性、定位或半定量分析的方法。 用于血液系统疾病的诊断、鉴别诊断及疗效判断；用于白血病细胞类型的判断。 基本步骤 1. 固定:目的是保持细胞固有结构和化学成份不变，分蒸汽固定和液体固定。 2. 显示:通过化学反应显示被测物质，有偶氮偶联法，联苯胺法，金属沉淀法等。 3. 复染：作为背景染色，使反应的细胞结构能更清楚显示出来。 ??? [原理]??? 机体多余的铁以铁蛋白及含铁血黄素的形式储存。这些铁与低铁氰化钾在酸性溶液中发生反应而呈蓝色。 [试剂] 40g/l亚铁氰化钾溶液。 4%盐酸（38%浓盐酸40ml，小心倒入340ml冷蒸馏水中，混匀） 20g/l伊红溶液。 甲醛溶液。 [方法] 取骨髓片2张，加固定液固定10min，水洗待干。 将II缓缓滴入I内，混合后染液滴于骨髓涂片上， 37°C放置60分钟，流水冲洗数分钟 流水冲洗，一张待干观察外铁，一张冲洗后用核固红复染1分钟，冲洗待干，观察细胞内铁。 [结果观察] 幼红细胞核染成鲜红色，胞浆呈淡黄色，铁粒呈蓝绿色。 （1）细胞外铁：用低倍镜观察骨髓小粒,细胞外铁主要存在于巨噬细胞胞浆内,而被染成蓝色，再用油镜判断阳性程度。分为（-）、（+）、（++）、（+++）、（++++）。 细胞外铁阳性（++）