牛乳中酪蛋白制备.pptVIP

* ? 实验七 牛乳中酪蛋白的制备 目的要求 学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。 ? ?实验原理 牛乳中主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4.7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，乙醚除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。 试剂和器材 试剂： 95%乙醇；乙醇—乙醚混合液 (V/V=1∶1);无水乙醚 0.2mol/L pH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液 材料 纯牛奶(蒙牛) 1．将25mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸调pH值至4.7。 2. 将上述悬浮液冷却至室温。离心10min(3000r/min)弃去上清液，得酪蛋白粗制品。 3．用水洗沉淀两次，离心5min(3000r/min)，弃去上清液。 操作方法 3．用乙醇洗沉淀1次，离心5min(3000r/min)，弃去上清 液。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀1次。最后用乙醚洗沉淀1次， 各离心5min(3000r/min) 。 4．将沉淀摊开在表面皿上，风干；得酪蛋白纯品。 5．准确称重，计算含量酪蛋白g/100mL牛乳（