质粒DNA的提取-四川大学.PPTVIP

Part01 Part02 Part03 具体实验步骤 P01 质粒DNA的提取 质粒DNA的提取 P02 质粒DNA的提取 P03 感受态细胞经转化培养后，平皿内有但菌落长出。 用灭菌吸头挑取单菌落，浸没于2 mL含有抗生素的LB液体培养基中，37 ℃, 180 r/min振荡培养过夜。 取1.5 ml 培养物倒入微量离心管中，用微量离心机于4 ℃、11000 r/min 离心1分钟，吸弃上清。 Part01 Part02 Part03 具体实验步骤 P04 质粒DNA的提取 质粒DNA的提取 P05 质粒DNA的提取 P06 向离心管中加入150 ?l用冰预冷的溶液Ⅰ，用微量移液器吹打重悬沉淀。 加入200 ?l新配制的溶液 Ⅱ，盖紧管口，快速颠倒离心管5次，冰上放置5分钟 加入150 ?l用冰预冷的溶液 Ⅲ，轻轻混匀，冰上放置3~5分钟。 Part01 Part02 Part03 具体实验步骤 P07 质粒DNA的提取 质粒DNA的提取 P08 质粒DNA的提取 P09 用微量离心机于4 ℃、11000 r/min离心5分钟，吸取上清转移到另一离心管。 加等体积氯仿400 ?l抽提，振荡混匀，用微量离心机于4 ℃、11000 rpm离心2分钟，将上清转移到另一离心管中。 用70%乙醇洗涤2次，再次4 ℃、11000 rpm离心5分钟，沉淀于空气中干燥。向已