发酵工程—5.微生物的代谢和调节工程.pptVIP

发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 改变细胞的通透性的方法： 3、还可加入表面活性剂如Tween－80或阳离子表面活性剂，将脂类从细胞壁中溶解出来，使细胞壁疏松，通透性增加； 4、控制Mn2+、Zn2+的浓度，干扰细胞膜或细胞壁的形成。 另外，还可以通过诱变育种的方法，筛选细胞透性突变株。 2、代谢调控 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 ㈢ 改变菌种的遗传特性 改变微生物的遗传特性，即改变酶的活性或酶的合成系统，使之对反馈调节不敏感，达到过量生产代谢产物的目的。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 筛选抗反馈调节突变株： 通过诱变育种的方法获得。包括营养缺陷型突变株、抗反馈调节突变株、组成型突变株、抗性突变株等的应用。 例如，在分支合成途径中，利用黄色短杆菌抗α-氨基-β-羟戊酸(苏氨酸的一种结构类似物)的突变株发酵生产苏氨酸，由于该菌株的同型丝氨酸脱氢酶对苏氨酸的反馈抑制不敏感，可以使发酵液中苏氨酸的浓度高达14g/L。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 在分支合成途径中可以利用营养缺陷型突变株生产其中的一个末端产物。 如：选择高丝氨酸脱氢酶营养缺陷型。大量生产赖氨酸。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 A B C D E 在直链式合成途径中，不能利用营养缺陷型突变株生产该途径中的末端产物，但可以利用这种菌株生产中间产物。例如，利用谷氨酸棒状杆菌营养缺陷型(转氨甲酰酶缺陷)可以大量积累鸟氨酸。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 除了利用抗反馈调节突变株和营养缺陷型菌株生产外，还可以利用既是抗反馈调节突变株，又是营养缺陷型菌株的双重突变株进行氨基酸发酵。 例如，利用甲硫氨酸营养缺陷型和抗α-氨基-β-羟戊酸的黄色短杆菌过量合成苏氨酸； 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 2、代谢调控 人工控制黄色短杆菌的代谢过程生产赖氨酸？ 天冬氨酸 中间产物Ⅰ 天冬氨酸激酶 中间产物Ⅱ 甲硫氨酸 苏氨酸 高丝氨酸 赖 氨 酸 营养缺陷 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 次级代谢产物的主要调控机制 次级代谢是存在于某些生物如植物和某些微生物中一类特殊的代谢类型。研究最多的是抗生素，其他包括生长刺激素、生物碱、维生素、色素、毒素等。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 次级代谢的调节类型 因为次级代谢产物的种类在不同的微生物中非常不同，所以次级代谢途径远比初级代谢复杂，其代谢调节类型的多样亦可想而知。已知抗生素等次级代谢产物生物合成的调控类型包括诱导调节、碳分解产物调节、氮分解产物调节、磷酸盐调节、反馈调节、生长速度调节等。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 酶合成的诱导调节 在次级代谢途径中，某些酶也是诱导酶，在底物或底物的结构类似物存在时才会产生。 例如，卡那霉素-乙酰转移酶是在6-氨基葡萄糖-2-脱氧链霉胺（底物）的诱导下才能合成。 参与展开青霉的棒曲霉素合成的酶是被生物合成中的中间产物6-氨基水杨酸、龙胆酰醇和龙胆酰醛顺序诱导合成。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 反馈调节 反馈调节在次级代谢产物的生物合成中有着重要的作用，包括: 次级代谢产物的自身反馈调节； 分解代谢产物调节； 初级代谢产物的反馈调节； 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 次级代谢产物的自身反馈抑制和反馈阻遏 在多种次级代谢产物的发酵中，都发现了末端产物的反馈调节作用。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 如： 卡那霉素合成途径中，卡那霉素能够反馈抑制其合成途径中催化最后一步反应的酶N-乙酰卡那霉素转移酶的活性； 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 氯霉素合成途径中，氯霉素能反馈阻遏其合成途径中第一个酶：芳香胺合成酶的活性，但不影响菌体内其他芳香化酶的活性。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 3、次级代谢产物的调控 分解代谢产物调节 定义：指易被菌体迅速利用的碳源和氮源及其分解产物对其他代谢途径的酶类的调节作用。 发 酵 工 程 - 微生物的代谢和调节工程 1、微生物的代谢类型和自我调节 有些酶的合成不依赖于环境中物质的存在（如糖酵解途径中的各种酶），称为组合酶。 另一些酶只有在它们催化的底物（或底物的结构类似物）存在时才能合成，此种酶称为诱导酶。