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外泌体的生物特性及在肿瘤临床诊断中的应用 陈利鹏 摘要 ：外泌体是生物体内广泛存在的由各类细胞释放的囊泡小体， 被磷脂双分子层包裹。 里面含有蛋白和 RNA 等多种成分，在细胞间信息传递中扮演重要角色。具有抗肿瘤免 疫、促血管新生等生理功能。 在肿瘤的发生发展中起着重要的作用， 特别是有携带肿瘤 遗传信息、 调节肿瘤微环境、 促进肿瘤血管生成等效应。 越来越多的研究将目光投向了 利用外泌体进行疾病的诊断、 预后及治疗临床应用。 本文就其研究现状和在肿瘤临床诊 断中的应用做简要综述。 关键词：外泌体，肿瘤，诊断，临床应用 1 外泌体简介 外泌体（ exosome）是细胞向外分泌的一种囊状小泡，直径大约 40-140 nm 。具有 脂质双层膜结构 [1] 。Johnstone 在网织红细胞培养液中分离得到一种囊泡状的结构物质， 并将其命名为外泌体（ exosome）[2] 。但当时研究人员认为它只是一种细胞的废弃物。 最近几年研究发现， 外泌体广泛存在并分布于各种体液中， 携带和传递重要的信号分子， 形成了一种全新的细胞间信息传递系统， 影响细胞的生理状态并与多种疾病的发生和进 程密切相关。 2013 年，诺贝尔生理或医学奖颁发给了外泌体领域的三位科学家，使得 外泌体成为医学领域研究的热点。目前外泌体研究主要集中在细胞通讯介导细胞行为、 生物标志物筛选、药物载体研发三大方向 [3] 。 1.1 外泌体的形成 真核细胞和原核细胞都能分泌细胞外小囊泡（ extracellular vesicles ， EVs ）。在哺 乳动物中，血液、淋巴液、组织液、尿液都能分离到 EVs[4] 。细胞向外分泌的膜性小囊 泡有多种，包括微泡（ microvesicle ）、凋亡小体和外泌体。微泡是细胞胞体直接出芽， 脱落后形成的细胞外囊泡， 直径约 50-1000 nm 。凋亡小体则是细胞凋亡时产生的囊泡， 一般直径在 500-2000 nm 。外泌体是通过细胞内体途径生成，首先是细胞内内溶酶体微 粒体内陷，形成多囊泡小体（ multi-vesicle body ，MVBs ），在刺激作用下， 多囊泡小 体与细胞膜融合，然后将小体内的囊泡释放到细胞外，即为外泌体。外泌体大小均一， 直径一般在 40-140 nm [5] 。 1.2 外泌体的组分 外泌体是膜性小体， 富含胆固醇和鞘磷脂。 外泌体内含有蛋白、 脂质、DNA 、RNA ， 能作为信号分子传递给其他细胞从而改变其他细胞的功能。 蛋白质占据了外泌体内含物的很大部分， 种类非常丰富， 根据 Vesiclep 数据库显示， 外泌体以及各种胞外囊泡中大约包含 92 897 种蛋白质 [6] 。这些蛋白大致可分为两类： 一 类是外泌体中普遍存在，参与其结构形成的蛋白质，多分布于外泌体的表面或内腔中， 包括微管蛋白、 肌动蛋白和微丝结合蛋白等细胞骨架成分； 膜转运和融合相关蛋白， 如: Annexins 、多种 Rab 蛋白、 Flotillin 、Alix 和 TSG101 等；一些信号分子，如蛋白激酶、 G- 蛋白等；还有大量与外泌体生成密切相关的四跨膜区蛋白质超家族成员，如 CD9 、 CD63 、CD81 和 CD82 等 [7, 8] 。另一大类蛋