禽腺病毒江苏株(js)复制非必需片段的确定.pdf

卷 期 !! 微 生 物 学 报 ’( )!! .’ ) 年 月 #$$! % !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,- #$$! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 禽腺病毒江苏株（ ）复制非必需片段的确定 ! 何秀苗 秦爱建 刘岳龙 金文杰 （扬州大学 江苏省动物预防医学重点实验室 扬州 ##1$$5 ） 摘 要：利用 方法从一株 群禽腺病毒的分离物（ ）中扩增出其基因组的两个末端 片段和 片段、 EFG ! H0I6*J K L IMG 片段，并分别克隆进 载体，然后将 片段、片段和 片段同时克隆进 粘粒载体中，获得质粒 NO4P6M -8D K L IMG NQF ，再在该克隆片段中插入增强型绿色荧光蛋白（ ）基因，获得转移质粒载体 。将 NQF6H0I6L6IMG6K -OHE NH0I6-OHE NH0I6-OHE 转染已被该野生型 群禽腺病毒分离物感染了的鸡胚肾细胞进行同源重组，通过无限稀释法筛选重组 ! 病毒，结果获得了表达增强型绿色荧光蛋白的重组 群禽腺病毒 ，证明位于基因组右末端 片段和 ! LH0I6-OHE L IMG 片段之间的位点为病毒复制非必需区，为禽腺病毒的重组基因工程疫苗的研究奠定了基础。 关键词： 群禽腺病毒，复制非必需片段，确定 ! 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） R@/ 0 $$$26%#$5 #$$! $6$#526$! 腺病毒（ ， ）最早发现于 年， 了复制非必需片段的筛选，并成功表达了 的 !#$%’()* 0S 251 I3W 其基因组含有早期转录基因（ ）和晚期转录基 E# 基因。本研究以从鸡中分离的一株 群禽腺病 4264! ! 因（ ），其中 区与病毒复制、病毒代谢调节有 毒（ ）为材料，确定其复制非必需片段，以期 K26K1 4 H0I6*J 关，而4 区是腺病毒复制非必需区，位于病毒基因 构建更能适宜家禽免疫的可复制性病毒活载体，研 组N 基因和纤维蛋白基因之间，在该区域插入外 制基因工程疫苗，将为禽类重要传染病的控制发挥 源基因，不影响病毒复制而能使外源基因良好表