琼脂糖凝胶电泳：.pptVIP

西安医学院生化教研室 一 实验目的 学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法 鉴定质粒PUC19酶切结果 检测PCR的结果 一、决定DNA在琼脂糖凝胶中迁移速率的因素 DNA分子的大小 双链DNA分子在凝胶基质迁移的速率与其碱基对数的常用对数成反比。分子越大，迁移得越慢，因为摩擦阻力越大，也因为大分子通过凝胶孔径的效率低于较小的分子。 琼脂糖浓度 给定大小的线状DNA片段在不同浓度的琼脂糖凝胶中迁移速率不同。在DNA电泳迁移率的对数和凝胶浓度之间存在线状相关。 二 实验原理 二、琼脂糖凝胶电泳： 1．DNA分子大小：线性DNA分子在一定琼脂糖浓度内的迁移率与DNA分子量的对数成反比。 2．琼脂糖浓度：小于0.5kb 的DNA片段所需的凝胶浓度为1.2-1.5%; 分离大于10kb 的DNA片段所需的凝胶浓度为0.3-0.7%; DNA片段大小在两者之间的所需的凝胶浓度为0.8-1.0%。 分离不同大小DNA片段的合适琼脂糖凝胶浓度 琼脂糖（%） 分离DNA片段的有效范围（kb) 0.5 1-30 0.7 0.8-12 1.0 0.