5-1-含生物碱类成分中药制剂的分析教学内容.pptVIP

第五章 中药制剂中各类化学成分分析;?第一节 生物碱alkaloid类成分分析 ;序号 ;生物碱类型及其基本结构;生物碱类型及其基本结构;与中药化学差别;二、理化性质与提取分离;二、理化性质与提取分离;4、溶解性 游离生物碱：极性较小，不溶或难溶于水 能溶于乙醇、氯仿、丙酮、乙醚等有机溶媒中 分析中常用氯仿、乙醚作为提取溶剂 生物碱的盐类：大多易溶于水及醇 不溶于或难溶于苯、氯仿、乙醇等 该性质是相反的，可用来提取、分离、精制生物碱 但需注意：季胺碱、酰胺碱、和一些含极性基团较多的Alk则能溶于水 含酚羟基、和羧基的生物碱呈酸碱两性反应 ;二、理化性质与提取分离;二、理化性质与提取分离;生物碱沉淀沉淀试剂大体可分为三类 (1)与Alk生成不溶性盐类如：磷钼酸、硅钨酸(Alkertrand)、磷钨酸； (2)与Alk形成疏松的络盐如：碘－碘化钾试剂(Wagner)； (3)与Alk的氮原子反应，生成不溶性加成物如：碘化铋钾(Dragendorff)、碘化汞钾试剂(Mayer)。 ; 6、显色反应 有些Alk与某些试剂呈颜色反应，可借以识别Alk，但易杂质干扰，需净化后进行。 7、生物碱供试液的提取 主根据Alk的溶解度而定。 (1)有机溶剂提取 氨水湿润Alk游离，后用CHCl3、(CH3CH2)2O提取 较稳定的生物碱盐类，可用碱性较强的NaCO3、Ca(OH)２、NaOH碱化 本法缺点是不能提出水溶性生物碱 ; (2)醇水溶媒提取 用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水(如：0.1～1%)盐酸、硫酸、酒石酸等提取。 此法较简便，但提取出的杂质较多，需进一步纯化处理。 (3)混合溶媒提取 用不同极性的溶剂按不同比列混合，该法可以较好地提取出待测组分。 如：百部、粉防已用乙醚:氯仿:乙醇:10%NH3OH(25：8：25：1)。 ;二、理化性质与提取分离;8、生物碱样品预处理——精制 (1)萃取法 酸碱萃取法——经典法 Alk离子对萃取法，依据离子对萃取原理 生物碱在弱酸性介质→阳离子+大分子(离子对试剂) →复盐（水溶性小，溶于有机溶剂） 与水溶性杂质分离 若离子对试剂为有机染料，则该法还可用于生物碱的定量分析，如：小蘖碱可加入pH8.5的四溴酚酞乙酯缓冲液，CH2Cl2萃取，取CH2Cl2液比色测定。 (2)色谱法——柱色谱、色谱小柱;三、定性鉴别;（二）色谱鉴别;早期常用的有：酸碱滴定法、沉淀法、酸性染料比色法、雷氏盐比色法等 现用：分光光度法、TLC、HPLC、GC等 （一）总生物碱含量测定 1、经典化学法(重量法、容量法) (1)重量法 原理：Alk可与生物碱沉淀试剂定量反应生成沉淀，根据沉淀量可间接求出生物碱含量。此法操作较繁，费时、且准确度较差;四、含量测定方法;(2)容量法 分类：酸碱滴定、两相滴定、络合滴定、沉淀容量法等 I、酸碱滴定原理 生物碱呈碱性，可用酸滴定；pH指示剂指示终点。 生物碱盐，一般呈酸性(强酸弱碱盐)，可用强碱滴定。 因其终点在70-90%乙醇中比在水中明显，故可用标准碱的醇溶液滴定，以酚酞为指示剂指示终点;四、含量测定方法;四、含量测定方法;四、含量测定方法;2、光谱法定量;I 、酸性染料比色法 原理：与酸性染料滴定法相同 本法关键：pH值、酸性染料种类、有机溶剂 常用染料：甲基橙、溴麝香草酚蓝BTB、溴甲酚绿、溴酚蓝、溴甲酚紫等 有机溶剂选择：依据离子对与有机相能否形成氢键以及形成氢键能力的强弱 常用有机溶剂：氯仿、二氯甲烷 注意：微量水份可使有机相混浊，影响比色，应先脱水后测定;II 、雷氏盐比色法 原理：Alk与雷氏盐生成红色沉淀，此沉淀溶于丙酮，于520-526nm波长处，选择最大吸收波长，测定吸收度。根据雷氏盐丙酮液的ε为106.5(单盐)或203.0(双盐)。按下式计算样品生成雷氏盐重量（W，g）。;IV、其它比色法 苦味酸比色法 方法：沉淀加碱解离，以有机溶剂提出生物碱，将苦味酸的碱性水溶液进行比色 氯仿提取苦味酸生物碱盐，碱性缓冲液使盐解离，并将苦味酸提取而进行比色 氯仿提取苦味酸盐而直接进行比色。;主要有HPLC、GC、TLC等 1、TLC法 对样品纯化程度要求不高。但一般点样误差大，定量时，首先作一标准曲线，考察线性范围，确定定量方法(内标/外标、一点法/二点法)，均需同板标准品随行对照。同时要考察方法的稳定性、同板与异板的精密度 ;2、HPLC法;2、HPLC法; c、增加流动相的脂溶性 d、调整流动相的pH值 III、柱温 升高柱温 Ⅳ、样品液的制备 是定量分