ATP荧光法微生物(细菌总数)快速检测系统使用手册.docVIP

PAGE PAGE 6 ATP荧光法微生物（细菌总数）快速检测系统使用手册 （简称：BL细菌快检仪） 地址：沈阳市于洪区白山路101-2号 邮编：110034 电话：024 024传真：024Email： zklm@263.net 沈阳中科靓马生物工程有限公司 SHEN YANG ZHONG KE LIANG MA BIOTECHNOLOGY CO.,LTD 1、简介 2、原理 3、组成部件及相关功能 4、应用领域、特点、效益 5、检测注意事项及操作步骤 6、仪表的清洁、保养、故障排除 7、ATP浓度和相应荧光值关系曲线 不同浓度多种细菌混合物荧光值与相应细胞数关系曲线 RLU--细菌细胞数对照表（仅参考） 8、有关食品安全和卫生监测的问答 1、简介 “ATP荧光法细菌总数快速检测系统”简称“BL细菌快检仪”，由试剂组、微量荧光检测仪、样品预处理耗材三部件组成。它是由本公司依据萤火虫发光原理研制；经国家有关部门鉴定；关键试剂、组成部件均立足于国内；具有自主知识产权；与美、英、日同类产品性能相同，价格只及其一半的第一款国产细菌快检设备。可用于检测食品、饮料、原料乳中的细菌总数，也可供上述生产企业及检疫、环保、水政、海关等单位卫生监控使用，1-5分钟即能提供实时检测数据，并具备准确、便携、操作容易等特点。 2、原理： 萤火虫会发光是由于它能合成将化学物质的化学能转变为光能的生物催化剂—萤火虫荧光素酶（简称虫光素酶，luciferase）、虫荧光素（D-luciferin）、以及所有细胞生物都产生的生物能量物质—三磷酸腺苷（ATP）。在有氧的条件下，虫光素酶催化虫荧光素和ATP之间发生氧化反应，形成氧化荧光素并发出荧光，其生化反应式如下： ATP＋D-Luciferin＋O2 Mg++ AMP＋Oxyluciferin＋PPi＋CO2＋Light Luciferase 上式表明，只要具备适当条件，不仅萤火虫，即使在试管中也能发出荧光。当反应系统中，虫光素酶和虫荧光素处于过量的情况下，荧光的强弱取决于ATP的数量。以检测含细菌的样品为例，细菌细胞越多，ATP量越高，发出的荧光也就越强。由于虫光素酶对ATP的反应非常灵敏，荧光强弱可通过荧光仪计量。所以，在排除样品中非细菌ATP干扰的情况下，通过荧光值就能确定样品中细菌ATP的含量，通过相对荧光值和细菌细胞数的关系曲线，就能快速确定样品中细菌的细胞数。 3、组成部件及其功能： 3.1 试剂组，按检测操作顺序分为： （1）体细胞裂解试剂组（简称TRA），能专一而有效地裂解样品中的非细菌细胞（体细胞）并释出ATP，然后，通过过滤比色杯底部的滤膜将其排除。 （2）细菌细胞裂解试剂组（XRA），能专一而有效地裂解样品中细菌细胞并释出ATP。 （3）荧光反应试剂组（LLR），能与样品中的细菌ATP相互作用并有效地发出荧光。 3.2 微量荧光检测仪（也称微量光度计），准确计量检样的荧光值。 （1）液晶显示屏。 （2）安装电池室、外接交流电源插孔、整流器、及电池/交流电源插孔转换扳手。 （3）放置荧光反应比色杯的可拉动抽屉。 3.3 可供100次测定的样品预处理耗材。 （1）放置过滤比色杯的杯架一个。 （2）加压器一个，用于加压、排出体细胞ATP和试剂组。 （3）带滤膜荧光反应比色杯100个，为荧光反应容器。 （4）专用无菌吸水纸，置于过滤比色杯架，吸取加压后流出的液体。 （5）带刻度专用无菌浓缩器，用于浓缩样品。 （6）自备微生物学无菌操作所需常规用具、器皿，样品采集无菌、无ATP的容器、塑料袋、手套、镊子等。 4、应用领域、特点、效益： 4.1 使用BL细菌快检仪实施食品、饮料、乳品加工等全程卫生学监测 生产程序 监测内容 加工生产前 生产设施清洁、消毒效果检测，原、辅料细菌总数检测，以保障原料质量或明确原料品质级别。 加工生产过程中 加工生产后 废弃物排放、环境、人员 生产设备关键控制点（例如供水、通风阀门）卫生学监测，影响乳品发酵饮料、酒类特殊微生物总数检测。 制成品污染细菌总数检测。 卫生学及细菌总数检测。 4.2 两种微生物（细菌总数）检测方法的差别和利弊比较 方 方 法 利 弊 比 较 项 目 ATP荧光快检 常规平皿计数 可检范围 获得结果的时间 操作繁简 结果的效应 所有细菌、真菌、藻类 1-5分钟即得实时结果 简单，步骤少 快速、预警、溯源 只能检出可在特定培养基上生长的微生物（常用LB琼脂皿只检出需氧细菌） 需要多种特定培养基，需1-5天 烦琐、步骤多、人为影响因素多 滞后、检出结果保留时间长，有利于进一步化验 4.3 BL细菌快检仪的应用效益： （