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双组分TMB显色试剂盒.PDF
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USA:proteintech@
UK europe:europe@
China:Proteintech-CN@
双组分TMB 显色试剂盒
产品编号及包装规格:
B200050 TMB显色液A – 0.5 mL,TMB显色液B– 50 mL
B200051 TMB显色液A – 1mL,TMB显色液B– 100 mL
产品简介:
辣根过氧化物酶 (HRP)及其偶联物是免疫分析技术中常用的一种酶,由于3,3,5,5-四甲基联苯胺
(TMB)在HRP 的显色反应体系中,比其它色原物具有更高的灵敏度且无致癌性而被广泛应用。
Proteintech研制的双组分TMB显色液具有背景低,灵敏度高,生成的产物在一定时间内稳定,吸光度值
不改变的特点,很适合做为HRP反应体系的显色底物。主要应用于酶联免疫吸附实验 (ELISA),免疫斑
点杂交或者免疫组化等的检测分析。
本产品所含显色液A 为淡黄色透明液体,显色液B为无色透明液体,均无沉淀、颗粒及絮状物。使用
时与HRP溶液反应生成蓝色产物,加入酸性终止液 (2M H SO )终止后反应液由蓝色变为黄色,生成产
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物无絮状物,放置较长时间颜色仍保持稳定。
保存条件:
2-8℃避光保存,有效期1年。
使用说明:
1. 工作液配制:按A:B 1:100 比例,取出适量A 和B液在洁净的容器中混合即为工作液。工作液应现用
现配,一经混合,请立即使用。
2. 加液:显色时,将酶标板内HRP结合物用洗涤液清洗3-5次,每孔加底物显色工作液100 μL,在室
o
温 (15-25℃)或37 C下避光温育15-30分钟,直至显色至预期深浅。
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3. 终止:每孔加入与显色工作液等体积 (100 μL)的酸性终止液 (2M H SO )终止反应,孔中反应液由
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蓝色变为黄色。
4. 读数:终止反应后15分钟内,酶标仪450nm读取各孔溶液的光吸收值。
注意事项:
1. 如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上读
数;或者进一步稀释一抗或HRP结合二抗。
2. 使用时避免交叉污染。
3. 禁止TMB溶液接触任何金属材料。
4. TMB溶液孵育至室温后再使用。
5. TMB对人体有刺激性,请穿实验服并戴一次性手套操作,做好防护。
6. 终止液 (2M H SO )呈酸性,具有腐蚀性,严禁接触皮肤、眼睛、粘膜等。如果眼睛或皮肤接触了终
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止液,应立即用大量水冲洗之。
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