高中生物 第4章 现代生物技术 4.1 植物的组织培养名师课件 北师大版选修1.pptVIP

3.植物组织培养过程中污染的预防 污染就是指在组织培养过程中,培养容器内滋生菌斑,使培养材料不能正常生长发育,从而导致培养失败的现象。植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖,由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格。 污染有两种可能:(1)由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。(2)由植物材料消毒不当造成的。 可以通过以下措施做好预防。 (1)防止外植体带菌。①合理选择外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春、秋季为宜,优先选择地上部分作为外植体,采集时间一般选择在晴天的下午,应避免在阴雨天采集外植体,采集前应喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。②外植体消毒。③在室内或无菌条件下进行预培养。 (2)保证培养基及接种器具彻底灭菌。①培养基分装时,注射器勿与瓶接触,培养基勿粘瓶口;②检查封口膜是否有破损;③扎瓶口要位置适当、松紧适宜;④保证灭菌时间和高压锅内温度适当;⑤接种工具使用前彻底灭菌;⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。 (3)操作人员严格遵守无菌操作规程。如一定要规范着装,操作过程中不说话等。 (4)保证接种与培养环境清洁。①污染瓶经高压灭菌后再清洁;②接种环境定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和消毒;③定期对培养室消毒。 特别提醒对外植体进行表面消毒时,既要考虑到药剂的消毒效果